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目的：观察葛根素预处理(puerarin-preconditioning，PPC)对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤(hepaticischemia-reperfusioninjury，HIRI)的保护作用，并与缺血预处理(ischemia-preconditioning，IPC)的保护作用相比较，探讨葛根素预处理对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤是否具有保护作用，及其作用机制，以期为临床治疗提供实验依据。
方法：1.造模：取健康Waster大鼠150只，雌雄各半，体重200g～230g，用CCL4与乙醇复合法造肝硬化大鼠模型。造模成功后，随机抽取128只大鼠，按随机数字表法，分为4组(A、B、C、D)，每组分4时间亚组(a、b、c、d)，每亚组8只大鼠，均行开腹手术。术前禁食12h，自由饮水，以03％戊巴比妥钠30mg/kg，经腹腔注射麻醉，固定。4组大鼠分别行以下造模处理：A组(假手术组，n=32)，仅行开腹手术游离肝十二指肠韧带，不阻断其血流，作为正常对照组，以排除手术因素对实验结果的干扰；B组(缺血再灌注组，n=32)，消毒开腹显露肝门，游离肝十二指肠韧带血管、胆管，用无损伤血管钳夹闭血管造成全肝完全缺血，30min后松开血管钳，再灌注60min，形成肝缺血再灌注损伤模型；C组(缺血预处理组，n=32)，先行夹闭血管造成肝脏缺血5min，再灌注5min，反复共三次，随后再进行缺血30min，再灌注60min；D组(葛根素预处理组，n=32)，术前D组12h，1h分别2次经腹腔注射50mg/ml的葛根素10mg/100g体重。(其他各组给予等量生理盐水)，再行缺血30min，再灌注60min。2.血清检测：B、C、D组大鼠在再灌注Oh(即缺血前)、再灌注1h、2h、6h后分别从各时间亚组大鼠心内取血5.0ml，不加抗凝剂静置2h，并标明分组及动物编号，用自动平衡离心机离心。取部分血清测定丙氨酸氨基转移酶(alaninetransaminase，ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartateaminotransferase，AST)的含量，其余的置入-70℃冰箱内待测定一氧化氮(nitricoxide，NO)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)。取血后快速取右肝组织进行HE染色光镜观察；其他肝组织取0.5g制备10％组织匀浆，检测其中NO、SOD、MDA及肿瘤坏死因子-a(tumoraecrosisfactor-a，TNF-a)；A组在相对应的时间点取血及肝组织行上述检查。在实验完毕处死大鼠。
结果：1.血清及肝组织匀浆测定结果：①缺血再灌注1h时，各组血清酶AST的含量分别为362.3±37.6U/L、2886.9±324.0U/L、1砣8.1±110.1U/L、1舛3.5±n8.8U/L，升高幅度C组和D组明显低于.B组，差异具有显著性(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均旬.$)；蜘时含量分别为359.2~6.3U/L、1750.3±198.8U/L、3鳄.3M55U/L、464.6当3.2U/L，C组和D组与B组相比较，差异具有显著性(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均＜0.05)。②缺血再灌注1h时，NO的含量分别为9.32±~.29umol/L、5.67±0.40umo1/L、7.83±0.56umo1/L、7.78±0.53umol/L，C组和D组较B组明显升高(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均＜0.05)；缺血再灌注6h时NO的含量分别为9.36±0.31umol/L、9.84±0.53umol/L、9.31±0.34umol/L、9.48±0.50umol/L,C组和D组与B组相比较，C组差异具有显著性(C组P=0.032，＜0.05)，D组差异不具有显著性(P=0.182，＞0.05)。③缺血再灌注1h时，SOD的含量分别为№3{2.3U/4☆如洳.确叭71.8蚂.6U/mi、70.5±3.3U/mi，C组和D组与B组相比较，差异具有显著性(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均＜0.05)；缺血再灌注6h时含量分别为79.5±2.8U/ml、55.2±3.7U/mi、75.8±3.2U/ml、76.7±3.5U/mi，C组和D组与B组相比较，差异具有显著性(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均＜0.05)。④缺血再灌注1h时MDA的含量分别为4.82±0.63nmol/ml、11.07±1.04nmol/ml、6.73±0.39nmol/ml、6.68±0.55nmol/ml，C组和D组与B组相比较，差异具有显著性(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均＜0.05)；缺血再灌注6h时，含量分别为4.76±0.85nmol/ml、8.49±0.43nmot/ml、4.75±0.35nmol/ml、4.78±0.37nmol/ml，C组和D组与B组相比较，差异具有显著性(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均＜0.05)。⑤缺血再灌注1h时，肝组织中TNF-a的含量分别为32.65±2.31pg/ml、303.62±6.42pg/ml、123.25±7.64pg/ml、136.45±6.42pg/ml，C组和D组与B组相比较，差异具有显著性(两组P值分别为P=0.000、P=0.000均＜0.05)。
2.病理结果：病理组织学光学显微镜检查见各组低倍镜下均可见肝小叶结构紊乱，肝小叶重建，见纤维再分隔现象，肝内假小叶广泛形成，同时伴有明显的肝细胞结节状再生等肝硬化病理表现。A组：除上述表现外未见其他异常。B组：高倍镜下可见肝细胞核边聚、浓缩及溶解，胞浆疏松化，并有炎性浸润；见大量的红细胞淤积其内并有微血栓形成、中性粒细胞贴壁等。C组：高倍镜下可见肝细胞核边聚、浓缩及溶解，胞浆疏松化，但较B组显著减轻；但仍有红细胞淤积及微血栓形成现象，炎性细胞浸润减少。D组：高倍镜下偶见核边聚，胞浆疏松化；无明显红细胞淤积及微血栓形成等，汇管区炎性细胞浸润不明显。
结论：1.葛根素预处理与缺血预处理对肝硬化大鼠肝缺血再灌注损伤都有明显的保护作用，其主要机制是调节NO含量，扩张血管改善微循，通过升高SOD清除氧自由基，减轻脂质过氧化，降低组织内TNF-a含量等来实现其保护作用。
2.葛根素作为活血化淤中药在临床中广泛应用于心脑血管梗塞性疾病，同时它也可以启动肝硬化肝脏的内源性保护机制，达到保护作用。葛根素预处理作为一种药物预处理方法，以其方便、安全、易于控制量等优点，在临床上有良好的应用前景。