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目的：了解本地区肺炎克雷伯氏菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)情况及ESBLs基因型分布；分析产ESBLs的肺炎克雷伯氏菌耐药性及耐药特点。
方法：1.纸片扩散法(Kerby-Bauer法，K-B法)：采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的K-B法，检测79株肺炎克雷伯氏菌对15种抗生素的耐药性。
2.初步筛选试验(screeningtest)：选用头孢噻肟、头孢他啶、氨曲南、头孢曲松、头孢泊肟药敏纸片，凡头孢泊肟或头孢他啶的抑菌环直径≤22mm,头孢曲松≤25mm,氨曲南或头孢噻肟≤27mm，提示这些菌株为可疑ESBLs产生株，进一步作确认试验。
3.纸片确认试验(confirmatorytest)：将初筛可疑产ESBLs菌株同时用头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸，头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸作药敏试验，对任何一组药物，加克拉维酸比不加克拉维酸的抑菌环直径≥5mm可确认为产ESBLs菌株。上述三种试验均用肺炎克雷伯氏菌标准菌株ATCC700603作质控。
4.PCR：检测确认试验阳性的菌株携带的ESBLs基因型。根据blaTEM-3及blaSHV-2的序列设计两对引物，采用UNIQ-10柱式质粒小量抽提试剂盒提取质粒DNA用于PCR反应模板。各标本分别使用两对设计好的引物扩增blaTEM及blaSHV，阳性扩增片段长度分别为867bp和547bp。扩增产物进行凝胶电泳，紫外线检测仪观察结果并照相。
结果：1.受检的79株肺炎克雷伯氏菌对15种抗生素的药敏结果显示，对氨苄西林的耐药率最高，为86.08％；哌拉西林、头孢唑啉次之，耐药率分别是58.23％、54.43％；对头孢曲松、头孢噻肟、头孢泊肟、氨曲南、环丙沙星的耐药率分别是40.51％、37.97％、36.71％、34.18％、31.65％；对氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星的耐药率分别是22.78％、20.25％；对头孢他啶，头孢吡肟的耐药率分别为15.19％、13.92％；对头孢西丁、哌拉西林/三唑巴坦的耐药率为3.80％；所有菌株对亚胺培南敏感，耐药率为0。
2.初筛结果有50株可疑产ESBLs菌株，进一步经纸片确认试验有28株产ESBLs，占总数的35.4％。头孢噻肟与头孢噻肟/克拉维酸组检出28株产ESBLs菌株，而用头孢他啶与头孢他啶/克拉维酸组检出16株产ESBLs菌株，二者相比有显著差异(x2检验，P＜0.01)。
3.产ESBLs与非产ESBLs肺炎克雷伯氏菌株对亚胺培南全部敏感；产ESBLs菌对哌拉西林/三唑巴坦、头孢西丁的耐药率都为7.14％，与非产ESBLs的细菌相比无差异(x2检验，P＞0.05)；对头孢吡肟、头孢他啶的耐药率32.14％，与非产ESBLs的细菌相比有差异(x2检验，0.01＜P＜0.05)；产ESBLs菌株对氨苄西林/舒巴坦的耐药率是53.57％，对环丙沙星的耐药率是57.14％，二者与非产ESBLs的菌株相比有显著差异(x2检验，P＜0.01)；对氨曲南，头孢泊肟的耐药率分别为85.71％，89.29％，与非产ESBLs的菌株相比有显著差异(x2检验，P＜0.01);产ESBLs对头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑啉、哌拉西林高度耐药，耐药率为96.43％，与非产ESBLs细菌相比有显著差异(x2检验，P＜0.01)；产ESBLs菌株对氨苄西林全部耐药，非产ESBLs菌株对氨苄西林耐药率为78.43％，二者相比无差异(x2检验，P＞0.05)。42.8％的产ESBLs菌株同时对环丙沙星和阿米卡星耐药，4.3％的非产ESBLs菌株同时对这两种药物耐药，二者相比有显著差异(x2检验，P＜0.01)。4.28株产ESBLs菌株的PCR扩增结果为TEM型为4株(14.3％)，SHV型为5株(17.9％)；非TEM型，非SHV型占67.8％。
结论：1.本地区肺炎克雷伯氏菌对青霉素类抗生素耐药率很高，对大部分头孢菌素类、单环β-内酰胺类抗生素以及环丙沙星存在不同程度的较高耐药，对头孢他啶、头孢吡肟、氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星的耐药率较低，对头孢西丁、哌拉西林/三唑巴坦的耐药率很低，对碳青霉烯类高度敏感。
2.本地区肺炎克雷伯氏菌产ESBLs菌株流行严重。
3.产ESBLs细菌对常用抗生素的体外抗菌活性明显高于非产ESBLs细菌，对青霉素类、大部分第三代头孢菌素类抗生素耐药率很高，对喹诺酮类及氨基糖苷类耐药率也较高；相当部分对第四代头孢菌素敏感，大部分对头霉素类，β-内酰胺酶抑制剂复合制剂敏感；对碳青霉烯类高度敏感。
4.本地区肺炎克雷伯氏菌携带的ESBLs部分为TEM型和SHV型，非SHV非TEM型可能为其它型ESBLs。