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目的:冠心病(coronary artery disease, CAD)作为一种常见的心血管系统疾病,是导致中老年死亡的首要原因,现代医学认为CAD的发病基础为动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS),而AS是一种多因素参与的病理过程,其发病机制与血管内皮损伤、脂质的氧化与浸润、炎症细胞渗透、免疫性细胞因子的表达、氧化损伤、血管平滑肌细胞增殖与凋亡失衡、钙离子内流升高致使平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)内钙超载等多个病理环节有关。上述机制在导致粥样斑块侵蚀和崩解的过程中起了关键作用,而针对这些病理环节进行靶向治疗有望成为防治AS的有效手段之一。参芍口服液是临床上治疗AS有效的中药复方制剂,课题组前期研究显示,参芍口服液能够通过降低心肌梗死模型大鼠的血管内皮细胞黏附分子-1和E-选择素的表达,减轻氧自由基过氧化损伤,保护心肌线粒体结构及功能等多个途径发挥心肌细胞保护作用,但其对心血管系统的保护机制仍不确切,尤其是对动脉粥样硬化的疗效和机制仍未所知。本研究分三部分,通过构建大鼠主动脉粥样硬化模型,并用参芍口服液进行治疗,观察本方对大鼠主动脉粥样硬化模型的疗效,并在血脂水平、氧化应激、炎症因子表达这三个方面探讨其作用机制,为本方的开发提供一定的理论依据和实验基础。方法:50只SD大鼠随机分为5组(每组10只),分组为:1)空白对照组;2)模型组:采用维生素D3腹腔注射+高脂饮食制作动脉粥样硬化模型大鼠;3)参芍口服液低剂量治疗组;4)参芍口服液高剂量治疗组;5)辛伐他汀治疗组。空白对照组常规饲养,模型组和治疗组给予高脂饮食+VD360万IU/kg/d腹腔注射3天。4周后灌胃给药,参芍口服液低、高剂量组分别按4ml/d、8ml/d给药,辛伐他汀组按5mg/kg/d给药,其余组给予生理盐水灌胃处理,持续给药8周后处死。股动脉取血,采用直接测定法测定各组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C);采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组血清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathioneperoxidase,GSH-PX);紫外分光法检测过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)含量,观察参芍口服液对氧化应激损伤的影响;行HE染色观察各组大鼠主动脉粥样硬化病变程度;采用免疫组织化学染色法观察细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesionmolecule-1,ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(Vascular cell adhesionmolecule,VCAM-1)、白介素-1β (Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-17A(Interleukin-17A, IL-17A)、白介素-23(Interleukin-23,IL-23)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在主动脉上的表达;采用Western blot检测主动脉组织ICAM-1、VCAM-1、IL-1β、IL-17A、IL-23的蛋白表达。结果:1参芍口服液对大鼠主动脉粥样硬化病理形态的影响HE染色显示,大鼠主动脉粥样硬化模型组主动脉管腔变窄,内膜增厚,向管腔内突起,内膜下可见大量平滑肌细胞增殖,出现脂质斑块和泡沫细胞积聚,斑块底部可见钙质沉积和泡沫细胞坏死区域。弹力纤维变性、崩解和断裂,中膜萎缩,导致动脉壁三层结构紊乱。在内膜和中膜可见较多的斑块和炎细胞浸润。而在参芍口服液治疗组,尤其是高剂量治疗组,动脉粥样硬化斑块病变程度明显减轻。2参芍口服液对大鼠主动脉粥样硬化模型血脂水平的影响与空白对照组相比,大鼠主动脉粥样硬化模型血清中TC、TG、LDL-C含量明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);而给予参芍口服液治疗,能够显著降低大鼠主动脉粥样硬化模型的血脂水平,且高剂量参芍口服液组低于低剂量参芍口服液组(P<0.05),阳性药物对照辛伐他汀治疗组与模型组相比,血脂水平降低,高剂量参芍口服液组与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3参芍口服液对大鼠主动脉粥样硬化模型氧化应激水平的影响与空白对照组比较,大鼠主动脉粥样硬化模型组中血清MDA含量明显升高,GSH-PX、CAT、SOD含量降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);予以参芍口服液或辛伐他汀能够显著抑制该变化。其中,高剂量参芍口服液组与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P>0.05);高剂量参芍口服液组MDA含量低于低剂量参芍口服液组(P<0.05),GSH-PX、CAT、SOD含量高于低剂量参芍口服液组(P<0.05)。4参芍口服液对大鼠主动脉粥样硬化模型炎症因子表达的调控作用免疫组织化学染色结果提示,ICAM-1、VCAM-1、IL-1β、IL-17A和IL-23在大鼠主动脉粥样硬化模型中主动脉内膜呈阳性表达,而在正常对照组未见阳性表达。而予以参芍口服液或辛伐他汀治疗,ICAM-1、VCAM-1、IL-1β、IL-17A和IL-23阳性显色明显减弱。采用Western blot进行定量分析,结果显示,与空白对照组比较,模型组主动脉ICAM-1、VCAM-1、IL1β、IL-17A、IL-23蛋白表达明显增高,分别为空白对照组的3.07、2.92、2.42、3.21和2.34倍,差异均具有统计学意义(P<0.05)。予以高剂量参芍口服液抗动脉粥样硬化治疗8周后,ICAM-1、VCAM-1、IIL1β、L-17A和IL-23明显下调,分别是模型组的57.65%、52.05%、65.7%、59.5%和50.43%;低剂量参芍口服液治疗组,分别下调为模型组的64.16%、71.92%、84.3%、70.72%和62.39%。结论:1参芍口服液能够缓解或抑制大鼠主动脉粥样硬化的形成和发展。2参芍口服液能够通过调脂、抑制氧化应激和炎症反应等多条途径发挥抗主动脉粥样硬化的作用。