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背景:世界范围内糖尿病发病率已达到流行的程度，其慢性并发症如肾脏病变、视网膜病变、神经病变、心血管病变日益受到广泛关注，但糖尿病相关的肝脏病变却少有报道。临床工作中发现，糖尿病尤其肥胖患者，肝功能异常较为常见，其肝脏活检表现为不同程度的炎症反应、纤维化和脂肪变等病理改变，因此应重视糖尿病相关肝脏病变的诊治。与此同时，研究发现1，25(OH)2D3在多种慢性肝脏疾病中发挥重要作用，具有抗炎、抗纤维化作用。TLRs是机体固有免疫的首道屏障，但过度活化会造成机体的炎症反应，并促进组织纤维化的发生。通过对1，25(OH)2D3非经典作用的深入研究发现，其对TLRs具有调节作用。但是1，25(OH)2D3能否通过调节肝脏TLR4、NF-κB、TNF-a改善糖尿病肝脏的病变尚未见报道。
目的:本研究观察不同剂量的1，25(OH)2D3对糖尿病大鼠肝脏TLR4、NF-κB和TNF-a的调节作用，及其对肝脏的炎症和纤维化的影响，明确1，25(OH)2D3对糖尿病肝脏病变的作用机制。
方法:采用尾静脉注射STZ的方法制备糖尿病大鼠模型，将大鼠随机分为6组:正常对照组（C组）、糖尿病未干预组（D组）、小剂量1，25(OH)2D3干预组（L组，0.025ug/kg/d）、中剂量1，25(OH)2D3干预组（M组，0.15ug/kg/d）、大剂量1，25(OH)2D3干预组(H组，0.3ug/kg/d)、精蛋白锌胰岛素干预组（Y组，约16U/kg/d起始，通过监测血糖的结果进行剂量调整）。糖尿病大鼠成模后开始干预，1，25(OH)2D3干预组每日灌胃给药，胰岛素干预组于颈后皮下注射给药。监测体重、血糖变化，16周后股动脉取血测定大鼠血脂、肝功能、血清炎症因子。肝脏组织固定并包埋，采用HE、Masson、油红O染色方法观察肝脏炎症、纤维化、脂肪变程度，并进行相应评分;免疫组织化学方法检测肝脏TLR4、NF-κB和TNF-a的蛋白表达水平。冻存肝脏组织应用RT-qPCR方法检测TLR4、NF-κB、TNF-a的mRNA水平。各组间数据采用单因素方差分析进行比较。
结果:(1)本研究通过大鼠尾静脉一次性注射STZ(45mg/kg)成功制备了糖尿病大鼠模型;干预饲养16周后，发现糖尿病大鼠血糖、血甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、谷丙转氨酶(ALT)、血清CRP水平较正常对照组显著升高，白蛋白(ALB)显著降低(P＜0.05);与D组相比，大剂量1，25(OH)2D3能显著降低血糖、TG、LDL、AST、CRP水平，显著升高ALB(P＜0.05)，中剂量1，25(OH)2D3和胰岛素干预对上述部分指标亦有一定的改善作用。(2)HE、Masson、油红O染色发现D组大鼠肝脏存在不同程度的炎细胞浸润、窦周及肝细胞周围纤维化、小而密的脂滴沉积;通过对病变程度评分发现，D组肝脏损伤明显，大剂量1，25(OH)2D3可显著改善炎症分级、纤维化分期和脂肪变分度(P＜0.05)，而中剂量1，25(OH)2D3和胰岛素干预仅对炎症分级、纤维化分期有明显改善(P＜0.05)。(3)通过免疫组化和RT-qPCR对肝脏TLR4、NF-KB、TNF-a表达水平进行检测显示，糖尿病大鼠上述指标表达水平明显增加，而中剂量和大剂量1，25(OH)2D3可下调其表达并改善肝脏的炎症、纤维化程度(P＜0.05)。(4)监测大鼠血钙、磷代谢情况，各组大鼠间血钙、磷比较没有显著性差异(P＞0.05)，
结论:(1)STZ诱导糖尿病大鼠成模16周后出现不同程度的ALT升高、低ALB血症、血脂异常;肝脏炎细胞浸润、纤维化和脂肪变;肝脏TLR4—NF-κB—TNF-a表达上调。(2)1，25(OH)2D3对STZ诱导的糖尿病大鼠糖脂代谢有一定程度的改善作用。(3)1，25(OH)2D3可能通过下调TLR4—NF-κB—TNF-a的表达对糖尿病大鼠肝脏发挥抗炎、抗纤维化等作用，中剂量和大剂量效果明显。(4)本实验中不同剂量1，25(OH)2D3干预并未出现明显的高钙血症，但其对骨代谢指标的影响仍需进一步研究。