目的：通过对人上皮性卵巢癌细胞株3AO在紫杉醇(Paclitaxel,商品名Taxol)及紫杉醇联合LY294002作用后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达及细胞周期变化和细胞凋亡的分析,为卵巢癌化疗寻求一种新的高疗效辅助治疗手段及一种高效的生物学标记。 方法：人上皮性卵巢癌细胞株3AO体外培养(invitro culture),采用逆转录酶-多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,检测人上皮性卵巢癌细胞株3AO在紫杉醇和细胞经LY294002预处理24小时后紫杉醇(即紫杉醇联合LY294002)作用的CyclinD1基因的表达。同时采用流式细胞分析技术(FCM)分析人上皮性卵巢癌细胞株3AO在紫杉醇和经LY294002预处理的紫杉醇作用后细胞凋亡(apoptosis)及细胞周期,并检测细胞株3AO中CyclinD1蛋白的表达。 结果:RT-PCR检测,细胞株3AO中存在CyclinD1基因的扩增及过表达；细胞株3AO在紫杉醇和紫杉醇联合LY294002作用后其CyclinD1基因的mRNA表达水平不同,差异具有显著性,紫杉醇联合LY294002组,CyclinD1基因的mRNA表达水平呈逐渐减弱趋势。流式细胞术荧光单抗分析,结果一致。同时流式细胞术对细胞株3AO细胞周期及细胞凋亡进行分析,空白组,及单纯紫杉醇作用组和紫杉醇联合LY294002作用组细胞周期各时相、细胞凋亡率及细胞增殖指数PI(S+G2/M)值不同,细胞凋亡率逐渐增加,细胞增殖指数PI值逐渐下降,细胞生长受到抑制,CyclinD1蛋白表达水平逐渐下降。 结论： 1.紫杉醇作用于经LY294002预处理24小时后的3AO细胞株,能促进肿瘤细胞凋亡,对卵巢癌细胞的抑制具有协同效果。因此,紫杉醇联合LY294002治疗可能为卵巢癌的临床治疗提供一种可尝试的新的治疗方案。 2.本研究发现上皮性卵巢癌细胞株3AO中存在CyclinD1基因的异常扩增(amplifecation)及过表达,抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的同时,肿瘤细胞中CyclinD1基因的mRNA表达水平逐渐下降,CyclinD1基因的表达水平与细胞增殖成正相关,因此,认为CyclinD1有望成为一种监测卵巢癌细胞增殖活性的高效的分子生物学标记