【摘 要】
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本论文以大豆分离蛋白为原料,通过选取的碱性内切蛋白酶、As1.398中性蛋白酶、复合蛋白酶和复合风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,研究大豆蛋白酶法水解的温度、pH、酶与底
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本论文以大豆分离蛋白为原料,通过选取的碱性内切蛋白酶、As1.398中性蛋白酶、复合蛋白酶和复合风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,研究大豆蛋白酶法水解的温度、pH、酶与底物浓度之比(E/S)和底物浓度(S)等单因素最佳水解条件.利用正交实验,得到影响大豆蛋白水解的最佳条件为:(1)碱性内切蛋白酶的最佳水解条件:pH=7.5,T=60℃,E/S=4％,S=5％.(2)复合风味蛋白酶的最佳水解条件:pH=6.5,T=50℃,E/S=8％,S=4％.(3)As1.398中性蛋白酶的最佳水解条件:pH=7.0,T=55℃,E/S=4％,S=5％.(4)复合蛋白酶的最佳水解条件:pH=7.5,T=55℃,E/S=11％,S=3％.研究单酶在最适水解条件下,不同水解时间水解产物对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制活性.其中复合风味蛋白酶水解产物抑制效果最佳,水解8小时,对ACE半抑制浓度达到0.846mg/ml.同时采用同步加酶、分步加酶协同作用方式,不同水解时间水解产物对ACE的抑制活性.其中复合风味+复合蛋白酶同步加酶水解产物抑制效果较好,水解1小时,对ACE半抑制浓度达到1.158mg/ml.复合风味+复合蛋白酶分步加酶水解产物抑制效果较好,水解24小时,对ACE半抑制浓度达到0.962mg/ml.采用Sephadex G-25柱层析法,对抗高血压活力最强的大豆蛋白复合风味蛋白酶水解物进行粗分离,可得4个抗高血压肽段,根据标准曲线所得回归方程y=-0.0232x+5.077可推测出,其分子量为5826.32、974.99、876.19和270.52.
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