在体外折叠实验体系中，长期以来为了简化实验，往往忽略了体外与细胞内环境最大的不同之处--大分子拥挤环境。“大分子拥挤”这一概念指的是细胞容积的20％-30％都被各种大分子(如蛋白质、多糖等)占据，这样使任何一个大分子的实际可及空间大大压缩，而绝非是体外实验时，所简化的低蛋白浓度环境。因此在大分子拥挤环境下研究蛋白质的折叠是非常必要的。 肌酸激酶(CreatineKinase，CK)(ATP:CreatineN-phosphotransferaseEC2.7.3.2)在能量代谢过程中起重要作用，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。以来源于人肌肉的肌酸激酶(86kD)为模式蛋白，选用PEG、BSA、Dextran70，Sucrose为拥挤试剂，通过肌酸激酶在不同拥挤试剂中变性，研究拥挤环境对蛋白质去折叠的影响。结果表明，PEG和Sucrose对肌酸激酶的变性具有保护作用；BSA和Dextran70对肌酸激酶的变性没有保护作用。且PEG和Sucrose的保护作用随其浓度的增加而增大，BSA和Dextran70的相对活力随其浓度的增加而减小。 由于目前对于拥挤试剂对于蛋白质去折叠的影响，研究得并不多，而这种影响受到拥挤试剂本身特性的影响，以及蛋白质自身去折叠性质的影响，对于拥挤试剂规律性的认识还需要大量的实验。