目的：建立适合大规模、生产化的重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)纯化新工艺,提升产品质量,提高生产效率,节约生产成本。 方法：通过对rhGM-CSF复性工艺与纯化工艺的研究,其中包括对复性条件的筛选研究、蛋白纯化层析介质的选择与层析条件的研究,寻找出一条适合规模化生产的新纯化工艺路线。提高复性液蛋白浓度,并且在柱层析工艺步骤中用Q离子交换层析、疏水层析替代原工艺中的S-200凝胶层析、DEAE离子交换层析,简化操作流程,放大生产规模,最终形成rhGM-CSF的优化工艺。 结果：新工艺rhGM-CSF电泳纯度达到100％,HPLC纯度由95％提高到98％以上,rhGM-CSF的复性浓度由原来的0.1mg/mL提高到0.4mg/mL。比活为1.01×107IU/mg以上,新工艺活性蛋白总回收率为38％。 结论：建立了操作简便、单批产量大、适合大规模生产的rhGM-CSF制造新工艺。