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本文以野生型苹果酒酵母菌Y02为出发菌株,利用8×1015Ion/cm2注入剂量对出发菌株Y02进行诱变处理,得到一株产酒率较高的突变株IONⅡ-11dry,该突变株在初始糖度12%,酸度3.5,接种量7%,装液量80%,温度18~22℃条件下,发酵第10d产酒峰值为7.69%,比出发菌株Y02(第10d产酒峰值为7.15%)提高7.57%,然后对所选育的最优突变株IONⅡ-11dry进行其发酵条件的优化组合以及对其生物学特性进行研究。 本文研究所采用的方法步骤及所得出的结论如下: (1)选择7个不同的离子注入剂量,分别是8×1014、1×1015、3×1015、5×1015、7×1015、8×1015、1×1016(单位Ion/cm2),对出发菌株Y02进行离子注入诱变处理,然后制作杀菌曲线,求得致死率为72.3%时所对应的离子注入剂量是8×1015Ion/cm2,此注入剂量为最佳离子注入剂量。 (2)对出发菌株Y02进行Ⅰ次离子注入诱变处理,将诱变处理后的Y02进行稀释、涂布、培养,得到9个单菌落(10-3稀释),挑取单菌落进行发酵蒸馏实验,结果确定第9号菌落为一次离子注入诱变处理所选的最优突变株,记作IONⅠ-9。该突变株在初始糖度12%,酸度3.5,接种量7%,装液量80%,温度18~22℃条件下,发酵第10d的产酒峰值为7.32%,比出发菌株Y02(第10d产酒峰值为7.13%)提高2.67%。 (3)以IONⅠ-9为Ⅱ次离子注入诱变处理的出发菌株,对其进行Ⅱ次诱变,诱变处理过程同Ⅰ次诱变处理,结果挑取11个单菌落,经过发酵试验确定为第11号菌落为Ⅱ次离子注入诱变处理所选的最优突变株,由于该菌株的菌落特征表现为干燥状, jllJ南农业人学2002 o颀十论义 因此,记作*N‘’j dry。该突变株在初始糖度 12O,酸度 3.5, 接种量7%,装液量80%,温度18《2℃条件下,发酵第10d 的产酒峰值为 7.69%,比出发菌株 Ym(第 10d产酒峰值为 7二 5%)提高 7.57%。 5 门)对特异突变菌株*”l dry进行发酵条件的最优组合,结果 为:在初始糖度14%,酸度3刀,接种量7%,装液量90%,温 度20℃条件下,发酵第10d产酒峰值为7.89%。 u)对最终选育的最优突变株 ION‘’上 进行生物学特性研究, 结果如下:该菌形态特征为假丝状,细胞长与宽之比为等于或 大于Zllm,生理生化特征表现为对葡萄糖、蔗糖、乳糖和麦 芽糖均发酵不同化,对(NH。)。SO4和 KNO。都不u)IJ。 “)对最忧突变株 ION‘’八 dry和出发菌株 Y。。的蛋白质进行 SDS-PAGE电泳,结果发现其明显不同于出发菌株Y。。的带型, 该最优突变株 ION“刁 LL出发菌株 Y。。多出一条蛋白带。 ()对最优突变株 ION”* dry和出发菌株 Y。。的淀粉酶 i舌力测定, 结果发现该最优突变株可利川淀粉井产生水解圈,而出发菌株 Y02,则无止性质。