酶在许多生理过程中都扮演着关键的角色，与许多疾病的诊断及治疗息息相关。发展高灵敏、高选择性的检测酶活性的方法具有重要意义。荧光分析法因具备使用方便、灵敏度高、时空分辨率高等优点在众多酶活性分析方法中倍受青睐，而性能优良的荧光探针是发展新型酶活性荧光分析方法的基石。结合实验室的研究背景及在研课题，在本文中，我们设计合成了几种检测酶活性的新型荧光探针，详细研究了它们的性质，并开展了其在生物体系中的应用研究。主要工作包括以下四个方面:　　1.将γ-谷氨酰基与甲酚紫荧光团连接，设计合成了一种检测γ-谷氨酰转肽酶的新型荧光探针CV-Glu。该探针对γ-谷氨酰转肽酶表现出灵敏的显色和荧光响应，检出限低至5.6 mU/L。该探针具有高的选择性、良好的稳定性及生物相容性，不仅可以用于人血清样品中γ-谷氨酰转肽酶的检测，而且可用于细胞中该酶的成像分析，具有良好的应用前景。　　2.以谷胱甘肽为分子识别单元，丙烯酰氯为桥联基团，羟基半菁HXPI为荧光团，开发了检测γ-谷氨酰转肽酶的新型近红外荧光探针CyO-1。γ-谷氨酰转肽酶将探针中的γ-谷氨酰键特异性切断，进一步通过分子内重排成环反应释放出荧光团，体系荧光大幅提高。该探针具有良好的水溶性及近红外特性，可用于γ-谷氨酰转肽酶的抑制剂评价，还可用于斑马鱼中γ-谷氨酰转肽酶的成像分析。　　3.将γ-谷氨酰基与近红外荧光团氨基半菁AXPI连接，合成了另一个检测γ-谷氨酰转肽酶的近红外荧光探针CyN-1。该探针有效改善了CyO-1易受巯基物质干扰的不足，同时还可实现对γ-谷氨酰转肽酶的高灵敏检测。另外，探针的发射波长为710 nm，可有效避免生物基质的背景荧光干扰，该探针可用于活细胞中γ-谷氨酰转肽酶的成像分析以及小鼠肿瘤的活体成像分析。　　4.以羟基半菁HXPI为信号响应单元，头孢菌素为识别单元，发展了检测β-内酰胺酶的近红外荧光探针CyO-2。β-内酰胺酶可与探针分子中的β-内酰胺环发生特异性水解与切断作用，导致羟基半菁荧光团的释放并伴随着708 nm处的荧光显著增强。该探针可用于人尿液中β-内酰胺酶的检测;另外，基于其高灵敏及近红外的特性，该探针还可用于耐药性不同的金黄色葡萄球菌中β-内酰胺酶的成像分析。