近年来,以安全无毒的天然植物保鲜剂代替化学杀菌剂,用于防治柑橘采后病害成为研究热点。合掌消(Cynanchum amplexicaule)是我国特有的药用植物。本文以指状青霉(Penicillium digitatum)和意大利青霉(Penicillium italicum)为指示菌,采用生物活性追踪的方法,对合掌消中抑制病原菌的抑菌活性物质进行了分离、纯化,得到抑菌富集物,研究了合掌消抑菌富集物的抑菌机理,并探讨了其对柑橘果实的诱导抗病性机制以及在贮藏保鲜方面的影响。主要研究结果如下:1.以50%乙醇为溶剂,采用加热回流浸提法提取合掌消。通过萃取粗分离、AB-8大孔树脂、硅胶柱层析和薄层色谱检测对合掌消提取物进行分离、纯化,利用牛津杯法测定抑菌活性,对抑菌活性最强部分进行下一步分离,最终得到五个组分,其中组分1对指状青霉的抑菌圈直径最大,为29.48mm,表明组分1对指状青霉有较强抑菌活性,含有合掌消中较强的抑菌物质,组分1即为合掌消抑菌富集物。2.以指状青霉为供试菌,抑菌圈直径为指标,研究合掌消抑菌富集物的浓度与抑菌效果的关系,在此基础上进一步确定,其对指状青霉的最小抑菌浓度与最小杀菌浓度,并通过测定抑菌富集物对指状青霉的孢子萌发、菌丝生长形态、膜外电导率、脂质与麦角固醇含量、细胞保水性的影响,以揭示合掌消抑菌富集物的抑菌机理,此外还对富集物的稳定性进行了研究。结果表明:合掌消抑菌富集物的浓度与抑菌效果呈正相关,处理浓度越大,抑菌圈直径越大,对指状青霉的MIC、MBC分别为0.3mg/m L、0.6mg/m L。温度、p H对抑菌富集物的抑菌活性影响较小,性质较为稳定,能有效抑制孢子萌发,使菌丝畸形生长。作用于细胞膜,菌体脂质含量明显减少和麦角固醇合成受到抑制,破坏病原菌细胞膜的结构,使细胞膜通透性增强,内容物和离子等外泄,导致膜外电导率上升,细胞保水性下降。因此,合掌消抑菌富集物对抑制指状青霉的菌丝生长和繁殖有显著效果。3.纽荷尔脐橙预处理后,先接种3mg/m L(5MBC)合掌消抑菌富集物,再接种指状青霉孢子悬浮液,观察记录柑橘发病率与病斑直径,测定柑橘果实品质指标和抗病性相关酶的动态变化。结果表明:接种合掌消抑菌富集物能显著降低纽荷尔脐橙的发病率和病斑直径,对绿霉病有明显抑制作用。接种抑菌富集物果实的可溶性固形物、可滴定酸和抗坏血酸含量均维持在较高水平,明显高于对照组,而果皮中MDA含量减少,膜脂过氧化程度低。在接种72内,处理组果实POD、PPO、PAL活性快速升高,酶活性分别于72h时达到峰值,而对照组果实于96h才达到峰值,并且处理组POD、PPO、PAL活性最大值高于对照组,依次是对照组的1.54、1.99、1.92倍。以上结果说明,合掌消抑菌富集物是通过提前诱导防御酶活性升高,以增强果实抗病性,从而有效抑制柑橘绿霉病害。4.将0.3mg/m L(MIC)合掌消抑菌富集物复配海藻酸钠等制成复合涂膜剂,分别用复合涂膜剂与未添加抑菌富集物的涂膜剂对南丰蜜橘进行涂膜处理,测定在(5±1)℃贮藏条件下,果实品质和相关酶活性变化。结果表明:与对照组相比,复合涂膜剂处理对南丰蜜橘的防腐保鲜有明显效果,能降低果实腐烂率和失重率;降低呼吸速率,减少TSS、TA、VC、总糖等营养物质的消耗;同时维持总酚含量,抑制LOX活性,降低MDA含量;在贮藏前期诱导POD、PPO、PAL活性增强,提高抗病性,后期抑制POD、PAL活性,延缓衰老,但对PPO活性抑制效果不明显。