奶牛乳房炎是目前最常见的奶牛疾病之一,造成奶牛产奶量、牛奶营养成分及品质的重大损失,危害奶牛机体健康,严重影响奶牛养殖业的经济效益。多形核中性粒细胞(Poly-morphonuclear Neutrophils,PMN)是抵抗病原微生物侵入机体的重要防线,在非特异性免疫过程中发挥重要作用。当病原微生物侵入奶牛机体时,PMN被病原微生物激活后,PMN自身结构发生改变,形成复杂三维网状结构,称为中性粒细胞胞外诱捕网(Neutrophil extracellular traps,NETs)。近年来,NETs已经成为免疫学、医学领域的研究重点和热点之一。因此,研究影响奶牛NETs形成的相关研究具有一定学术意义和紧迫性。本试验对奶牛外周血中的PMN进行了分离与鉴定;利用激光共聚焦显微镜观测9种营养素和2种激素对奶牛中性粒细胞形成NETs的影响。利用铜、锌、硒、孕酮、雌二醇、油酸、棕榈酸、硬脂酸、乙酸、丁酸、丙酸的低、中、高3种浓度作用于PMN,以此研究奶牛中性粒细胞形成NETs的影响。试验结果如下:1.本研究表明与PBS组相比,0.8 mg/L微量元素铜可极显著诱导PMN形成NETs(p<0.01);与PBS组相比,1.0 mg/L微量元素锌、0.01 mg/L微量元素硒可显著诱导PMN形成NETs(p<0.05);与PBS组相比,0.5 mg/L微量元素铜、2.0 mg/L微量元素铜、0.1mg/L微量元素锌、3.0 mg/L微量元素锌、0.08 mg/L微量元素硒和2.0 mg/L微量元素硒对PMN形成NETs没有影响,差异不显著(p>0.05)。2.本研究表明与PBS组相比,100 ng/L雌二醇可显著诱导PMN形成NETs(p<0.05);与PBS组相比,20 ng/L雌二醇、200 ng/L雌二醇、5μg/L孕酮、20μg/L孕酮、40μg/L孕酮对PMN形成NETs没有影响,差异不显著(p>0.05)。3.本研究表明与PBS组相比,130μmol/L油酸、20μmol/L棕榈酸可极显著诱导PMN形成NETs(p<0.01);与PBS组相比,260μmol/L油酸、40μmol/L硬脂酸、80μmol/L硬脂酸、100μmol/L棕榈酸可显著诱导PMN形成NETs(p<0.05);与PBS组相比,65μmol/L油酸、50μmol/L棕榈酸、200μmol/L棕榈酸对PMN形成NETs没有影响,差异不显著(p>0.05)。4.本研究表明与PBS组相比,4 mmol/L丙酸、2.5 mmol/L丁酸可显著诱导PMN形成NETs(p<0.05);与PBS组相比,10 mmol/L乙酸、20 mmol/L乙酸、30 mmol/L乙酸、8 mmol/L丙酸、12 mmol/L丙酸、0.5 mmol/L丁酸、5.0 mmol/L丁酸对PMN形成NETs没有影响,差异不显著(p>0.05)。本研究发现,在体外试验中,不同浓度营养素和激素对PMN形成NETs有调控作用,其中一定浓度的铜、锌、硒、雌二醇、油酸、棕榈酸、硬脂酸、丙酸、丁酸对PMN形成NETs有促进作用;孕酮、乙酸对PMN形成NETs无明显作用。体外试验提示我们,通过激素和营养调控手段,为提高奶牛天然免疫功能提供研究依据,对提高奶牛免疫力,防治奶牛乳房炎等疾病有一定指导意义。