青杨脊虎天牛的无公害控制技术

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青杨脊虎天牛是近些年危害北方杨树的主要蛀干类害虫之一,本文以青杨脊虎天牛为研究对象,从7种白僵菌中筛选出对青杨脊虎天牛幼虫具有高毒力的球孢白僵菌Bb01菌株,并对其进行分子鉴定、生物学特性及致病影响因子研究,并开展了其对青杨脊虎天牛幼虫的致病和致病机理的探索;采用释放花绒寄甲和管式肿腿蜂两种天敌,以及白僵菌无纺布技术对青杨脊虎天牛进行室内外防治试验;采用不同频率的黑光灯在野外对青杨脊虎天牛成虫进行诱捕试验,结果如下:1.采用不同品种的7个白僵菌菌株对青杨脊虎天牛幼虫进行生物测定,结果表明:从原始寄主中分离的未知菌株对青杨脊虎天牛幼虫具有较高的致病力,死亡率为93.33%,校正死亡率为92.86%,感染率为85.71%,LT50为4.69d,LC50为4.77×106mL-1。该菌株与其它菌株间致死率差异显著。球孢白僵菌对青杨脊虎天牛幼虫的致病力明显高于布氏白僵菌。2.对未知菌株进行分子鉴定。TRIzol法提取DNA,采用真菌ITS-4通用引物,PCR特异性扩增效果极佳,测序后通过ITS序列分析得出未知菌株的序列长度为573bp,与NCBI数据库中已知球孢白僵菌菌株的相似度为99%,并定名为球孢白僵菌Bb01菌株。3.球孢白僵菌Bb01菌株的最适培养基为改良马丁氏培养基,菌落生长和产孢的最优培养温度为26℃,最佳湿度为100%,菌落的生长和孢子产量随着紫外线照射时间的延长而减少。4.球孢白僵菌Bb01对青杨脊虎天牛成虫的致病力不高,仅为16.67%;26-28℃条件下对青杨脊虎天牛幼虫的致病力最大,LT50分别为2.23d和2.58d,湿度在100%时的致病力最大,LT50为2.57d;通过虫体传代白僵菌可增强菌株的致病力。5.青杨脊虎天牛幼虫被球孢白僵菌Bb01菌株侵染后,幼虫体内解毒酶和保护酶活性变化明显,为了抵御白僵菌的侵害,解毒酶系羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性呈现先增长后逐渐降低的趋势,保护酶系过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性均呈现先增长后降低的趋势,并在72-96h出现最大值。由于白僵菌对幼虫机体的损伤,蛋白质含量和酚氧化酶活性的变化均表现为先上升后下降。6.受白僵菌侵染后的青杨脊虎天牛幼虫虫体外部发生深浅不一的颜色变化,且在扫描电镜下观察白僵菌孢子在体壁上萌发,以芽管穿透体壁进行侵染,在体表大量增殖;通过投射电镜观察在白僵菌的作用下青杨脊虎天牛幼虫的表皮组织和细胞、肌肉组织、脂肪体、细胞器、气孔均受到破坏。7.采用花绒寄甲和管氏肿腿蜂对青杨脊虎天牛进行防治,结果表明:温度对花绒寄甲卵孵化有明显影响,温度过高和过低均影响孵化率;花绒寄甲室内以1:100和1:3(寄主:寄甲)的比例投放卵或成虫对青杨脊虎天牛幼虫的寄生率为100%和66.67%,人工木段模拟投放以1:100和1:3(寄主:寄甲)比例投放花绒寄甲卵或成虫对青杨脊虎天牛幼虫的寄生率分别达到86.67%和72.22%;在木质部裸露状木段上投放花绒寄甲成虫或卵寄生率最高,以卵卡形式防治具有较高的防治效果;管氏肿腿蜂室内释放对青杨脊虎天牛老龄幼虫具有较高的寄生率,且增加天敌数量能有明显增加寄主死亡率;半自然状态下以1:5的虫蜂比例投放,对幼虫的校正死亡率为52.13%,但林间防治建议以1:3的比例投放;7种白僵菌菌株制作的无纺布室外条件下30d内孢子含量持续下降,筛选出防治青杨脊虎天牛的最佳菌株为球孢白僵菌Bb01和布氏白僵菌BbCF327,可作为林间防治的备用菌株。8.采用不同波段的黑光灯在野外对青杨脊虎天牛成虫进行诱捕实验,结果表明,青杨脊虎天牛成虫对紫外低波段320-368nm间具有趋光性,对368nm(黄)最为敏感,最佳诱捕时间为20:00-22:00,天气条件下晴天的诱捕效果要比晴转阴和阴天要好,黑光灯可作为当地青杨脊虎天牛危害的辅助监测手段。
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