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目的:研究不同年龄段(青年、老年)小鼠实验性肺纤维化中上皮细胞-间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标:上皮细胞标志物E-钙粘蛋白(E-Cadherin,E-Cad),间质细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle Actin,α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及转录因子Snail随病程进展的表达变化,初步探讨增龄对小鼠肺纤维化病变程度及EMT的影响,为进一步探索增龄促进肺纤维化进展的可能机制提供依据。方法:20周龄雄性C57/BL6小鼠60只,随机分为两组:青年组(20周龄)、老年组(饲养至26周龄)。上述两组每组再随机分为5组,其中1组作为生理盐水对照组(NS),给予气管内注入0.9%氯化钠注射液,于第28d处死;其余4组为肺纤维化模型组,按5mg/kg剂量,予气管内注入博来霉素(bleomycin,BLM),分别于造模后第7d、14d、21d及28d处死,取左肺制备石蜡切片,右肺液氮冻存后行相关蛋白RT-PCR检测。石蜡切片行HE染色及Masson染色,通过肺组织形态改变从而判断肺纤维化病变进展程度;免疫组织化学染色检测EMT相关指标E-Cadherin、Vimentin、α-SMA蛋白的表达水平,平均光灰度值使用美国Universal Imaging Porporation图像分析系统测量,反映病程中EMT的动态变化;RT-PCR法检测液氮冻存肺组织转录因子Snail1、Snail2及其调控蛋白E-cad的m RNA的表达水平。使用SPSS19.0对上述数据进行统计分析,所有数据均采取“均数标准差”表示,P<0.05,差异有统计学意义。结果:HE染色及Masson染色结果示BLM诱导的小鼠肺纤维化模型组,随病程进展,肺实质破坏、胶原生成量较对照组增加明显,表明造模成功。将老年与青年小鼠同时间点的纤维化病变程度进行对比,前者更严重。免疫组化法结果显示,E-Cadherin主要表达于肺泡上皮细胞、支气管黏膜上皮细胞。青年、老年两组小鼠对照组表达较多,各时间点模型组的表达较对照组减少,且随病程进展,减少更为明显,差异有统计学意义(P<0.05);进一步将两组模型小鼠的各个对应时间点表达量进行比较,老年较青年组表达较少(P<0.05),而两组对照组无明显差异。Vimentin主要表达于支气管黏膜上皮及肺间质细胞,α-SMA在对照组只表达于支气管及血管平滑肌细胞,而在模型组肺间质肌成纤维细胞中还可观测到其表达。上述两个指标在各时间点模型组表达较对照组增加,随病程进展,增多更显著(P<0.05);同时间点老年模型组较青年模型组表达较多(P<0.05),两组对照组无明显差异。RT-PCR法结果示在青年、老年两组小鼠中,随时间推移,Snail1及Snail2的表达均呈现先升高后下降的趋势(相较对照组,模型组14d表达量明显增加,28d较14d表达明显减少,P<0.05)。对比两组小鼠同时间点的表达情况,老年模型组较青年模型组于14d增加更为明显,28d减少更为缓慢(P<0.05),两组对照组无明显差异。E-Cadherin模型组14d、28d的表达较对照组减少,且随病程进展,减少更为明显(P<0.05)。相较青年模型组,同时间点老年模型组表达较少(P<0.05),两组对照组无明显差异,与免疫组化结果基本一致。结论:BLM气管内注入诱导小鼠肺纤维化模型成功,同时期老年模型组相较青年模型组肺纤维化及EMT程度更严重,而对照组无明显差异。老年模型组Snail1、Snail2、E-Cadherin较青年模型组变化更为明显。增龄可能通过影响小鼠肺纤维化模型EMT进程中转录因子Snail1、Snail2及其下游调节蛋白E-Cadherin等表达从而加重肺纤维化病变程度。