抗菌肽CC31单体肽和串联肽对羔羊小肠生长发育、免疫及盲肠菌群的影响

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yayaguo123
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羔羊断奶应激是困扰我国养羊业发展的严重问题,抗菌肽具有较小的分子量,能够安全稳定地为自然界各种生物提供保护,其具有独有的破膜杀菌机制以及不易引起细菌产生耐药性的特点,为降低断奶应激提供了新的解决思路。试验采用单因素试验设计方法,选取48只7日龄公羔,根据体重相近原则平均分为4组(每组3个重复,每个重复4只)。单体肽组饲喂添加300 mg/kg单体肽的基础日粮,串联肽组饲喂添加300 mg/kg串联肽的基础日粮,抗生素组饲喂添加300 mg/kg抗生素的基础日粮,空白组饲喂基础日粮,试验期28天。于羔羊14,21,28和35日龄时,在每个重复中随机取1只羔羊屠宰。采用组织学技术研究小肠组织及黏膜形态结构,采用相对荧光定量PCR技术研究小肠上皮紧密连接蛋白基因相对表达量及肝组织中免疫受体及免疫细胞因子基因相对表达量。采用ELISA酶联反应试剂盒检测血清中免疫球蛋白含量,采用高通量测序研究盲肠肠道菌群结构组成。结果显示:1、日粮添加抗菌肽CC31单体肽和串联肽显著增加十二指肠、空肠和回肠绒毛高度、绒腺比及绒毛表面积(P<0.05),并显著降低隐窝深度(P<0.05)。2、单体肽组显著提高十二指肠ZO-1基因相对表达量(P<0.05),单体肽组有提高Claudin-1基因相对表达量的趋势,抗生素组、串联肽组和单体肽组均显著提高了空肠ZO-1基因相对表达量(P<0.05),单体肽组和抗生素组显著提高了空肠Claudin-1基因相对表达量(P<0.05),串联肽组具有提高空肠Claudin-1基因相对表达量趋势,单体肽组具有提高回肠ZO-1基因相对表达量趋势。3、随着日龄的增长,羔羊血清中Ig A、IgG和IgM含量均显著增加,串联肽组和单体肽组均显著提高了羔羊血清中IgA含量(P<0.05),与抗生素组无显著差异(P>0.05)。单体肽组显著提高了IgG含量(P<0.05),串联肽组具有提高IgG含量的趋势,单体肽组显著提高血清中IgM含量(P<0.05),串联肽组具有提高羔羊血清中Ig M含量的趋势。4、单体肽组和串联肽组显著下调了TLR2和TLR4基因相对表达量(P<0.05)。单体肽组和串联肽组均显著下调IL-6基因、IL-2基因、IFN-γ基因和TNF-α基因相对表达量(P<0.05)。5、羔羊肠道菌群主要由厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)及放线菌门(Actinobacteria)组成。拟杆菌门(Bacteroidetes)在14 d、21 d时,串联肽组和单体肽组显著高于空白组,厚壁菌门(Firmicutes)在35 d时串联肽组和单体肽组显著高于空白组(P<0.05),放线菌门(Actinobacteria)在35 d时,单体肽组显著低于空白组(P<0.05),变形菌门(Proteobacteria)在14 d时单体肽组具有高于空白组的趋势,在21 d时串联肽组显著高于空白组(P<0.05)。试验结果表明:抗菌肽CC31具有促进肠道上皮细胞发育,改善肠道组织形态结构的功能;抗菌肽CC31能够上调肠道上皮紧密连接蛋白基因相对表达量,保障肠道粘膜屏障功能;抗菌肽CC31能够提高羔羊血清中Ig A、IgG和Ig M含量,有助于羔羊机体免疫系统的构建;抗菌肽CC31具有下调羔羊组织中TLR2和TLR4基因相对表达量以及促炎细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ基因相对表达量的作用,降低了羔羊断奶应激引起的炎症反应,有助于羔羊机体免疫系统的建立;抗菌肽CC31对羔羊盲肠肠道菌群结构组成具有一定的影响,具有提高肠道菌群丰度和多样性的作用,并起到提高有益菌群的定植,降低有害菌含量的作用。结论:抗菌肽CC31单体肽和串联肽具有降低羔羊断奶应激影响,保障羔羊肠道健康发育,促进机体免疫系统的建立,改善肠道菌群的作用。单体肽与串联肽相比,单体肽效果较串联肽更好。
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