【摘 要】
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目的:通过最小抑菌浓度和红细胞溶血实验筛选3种抗菌肽,建立兔细菌性眼内炎动物模型,分别向玻璃体腔注射抗菌肽和抗生素,评估抗菌肽对眼内炎的疗效。方法:（1）最小抑菌浓度:用肉汤法检测5种抗菌肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。（2）红细胞溶血实验:制备4%红细胞悬液,37℃下与不同浓度的抗菌肽孵育1h,测定吸光度计算抗菌肽的溶血分数。（3）新西兰大白兔36只,向玻璃体腔注射浓度为1×10~3
【基金项目】
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吉林省科学技术厅国际合作项目（编号:20190701076GH）； 吉林省科学技术厅重点研发项目（编号:20200404103YY）；
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目的:通过最小抑菌浓度和红细胞溶血实验筛选3种抗菌肽,建立兔细菌性眼内炎动物模型,分别向玻璃体腔注射抗菌肽和抗生素,评估抗菌肽对眼内炎的疗效。方法:（1）最小抑菌浓度:用肉汤法检测5种抗菌肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。（2）红细胞溶血实验:制备4%红细胞悬液,37℃下与不同浓度的抗菌肽孵育1h,测定吸光度计算抗菌肽的溶血分数。（3）新西兰大白兔36只,向玻璃体腔注射浓度为1×10~3CFU/ml耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,建立细菌性眼内炎模型;24h后,玻璃体内注射药物治疗,观察及评分。根据治疗药物,将36只大白兔分为6组,A组:玻璃体内注射1mg/0.1ml PBS;B组:玻璃体内注射1mg/0.1ml AMP溶液;C组:玻璃体内注射1mg/0.1ml VAN溶液;D组:玻璃体内注射1mg/0.1ml IK-12溶液;E组:玻璃体内注射1mg/0.1ml IP-12溶液;F组:玻璃体内注射1mg/0.1ml WP-12溶液。注射药物0h、24h、48h、72h时观察角膜、结膜、玻璃体及视网膜,并进行评分;注射药物72h后过量麻醉处死兔子,无菌条件摘取眼球,每组5只眼球进行平板计数,1只眼球进行病理染色。结果:（1）最小抑菌浓度:当菌液浓度为1×10~8CFU/ml时,抗菌肽的最小抑菌浓度为8-64μg/ml。当菌液浓度为1×10~5CFU/ml时,抗菌肽的最小抑菌浓度为4-16μg/ml。（2）红细胞溶血实验:在5种抗菌肽中,IK-12和PP-12溶血分数较高,当浓度达到1000μg/ml时,溶血分数超过30%,而PK-12、WP-12溶血分数较低;当浓度达到1000μg/ml时,溶血分数低于10%。当浓度降到250μg/ml时,所有抗菌肽溶血分数不超过4%。（3）玻璃体腔注射药物时,所有组在眼内炎临床评分上比较无明显差异（p>0.05）;玻璃体腔注射药物24h、48h及72h,所有组在眼内炎临床评分上比较有明显差异（p<0.05）;组织病理学检查,A组无完整的视网膜层,玻璃体腔充满了炎症细胞;B组:部分视网膜坏死,玻璃体腔充满了炎症细胞;C组:视网膜组织结构大致正常,玻璃体腔未见炎症细胞;D组:视网膜组织结构大致正常,玻璃体腔散在的炎症细胞;E组:视网膜组织结构大致正常,玻璃体腔散在的炎症细胞;F组:视网膜组织结构大致正常,玻璃体腔散在的炎症细胞。结论:抗菌肽IK-12、IP-12和WP-12对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度低且对红细胞毒性小,早期玻璃体腔注射抗菌肽IK-12、IP-12和WP-12可有效治疗兔细菌性眼内炎。
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