刀豆蛋白A通过ERK1/2信号途径诱导CRL2480细胞表达IL-8

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白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)是炎症性α-趋化因子,对于白细胞的趋化募集和血管生成有重要的作用。内皮细胞是 IL-8的主要来源之一,研究报道IL-4和LPS可以通过ERK1/2信号途径诱导内皮细胞表达IL-8。刀豆蛋白A又称伴刀豆球蛋白A(Concanavalin A,Con A),是一种植物凝集素,具有广泛的生物活性。虽然研究报道,Con A可以激活巨噬细胞、肿瘤细胞和成纤维细胞ERK1/2信号途径,但尚不清楚Con A是否能够诱导内皮细胞释放IL-8及激活ERK1/2信号途径。CRL2480细胞系是常用的人脐静脉内皮细胞系。本研究以CRL2480细胞为研究模型,探讨Con A对CRL2480细胞表达IL-8以及p-ERK1/2的影响。  本研究采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测CRL2480细胞IL-8的分泌水平,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)方法检测IL-8 mRNA的相对表达水平,采用蛋白质印迹(Western blot)检测细胞内 ERK1/2的磷酸化水平,采用免疫荧光技术检测 CRL2480细胞p-ERK1/2的荧光表达。  结果发现:Con A能够诱导CRL2480细胞IL-8的释放和IL-8 mRNA相对表达水平升高(P均<0.05);Con A诱导的ERK1/2磷酸化水平也显著高于对照细胞(P<0.05)。此外,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)抑制剂(PD98059)和细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)抑制剂(U0126)均显著抑制了Con A诱导的IL-8蛋白分泌和mRNA表达。PD98059和U0126也能够抑制ERK1/2的磷酸化(P均<0.05)。  总之,Con A能够显著诱导CRL2480细胞表达IL-8,其机制很可能是通过ERK1/2信号途径的激活。
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