酚类物质与IAA的反应产物对桉树试管苗生根的影响

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本研究以酚类物质与IAA为原料,探讨在多酚氧化酶(PPO)催化的催化下,酚类物质与IAA反应产生的新物质的结构以及理化性质,同时以桉树试管苗‘巨桉’为供试材料,探讨反应产物对桉树试管苗生根的影响,观察并统计生根情况;同时测定添加反应物对其试管苗生根过程中相关酶活性如过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)及吲哚乙酸氧化酶(IAAO)和内源激素的影响,探讨反应产物与桉树试管苗不定根产生之间的关系,为解决木本植物试管苗生根困难等问题提供理论指导。主要研究结果如下:1、经HPLC对产物进行分离、提纯发现,产物色谱峰纯度高,达到鉴定要求;通过光谱归一化法可知,产物的光谱图重叠较好,峰纯较高,同时利用UPLC-Q-TOF-MS对产物进行了分子量鉴定,结果表明,产物为小分子化合物。2、桉树‘巨桉’试管苗最佳生根培养为1/2MS+NAA0.5mg·L-1+IAA 0.2mg·L-1+植物凝胶2g·L-1,生根率达61.7%,当在此生根培养基上添加0.2mg·L-1产物后可提高其生根率,生根率为77.8%。结果表明产物对桉树试管苗的生根有促进作用,添加产物(C2)处理下生根率、平均根长均高于添加IAA(C1),但两个处理根系活力差异不明显。3、通过测定桉树试管苗在不同处理下生长第20天的可溶性糖和可溶性蛋白含量,结果发现,三组处理水平下的结果差异性不显著。4、研究添加产物对桉树‘巨桉’在生根过程中POD、PPO、IAAO活性的动态变化,结果表明:与C1相比,添加产物后(C2)后桉树试管苗的POD活性峰值在整个生长过程中出现了两次,分别在第2d和第7d,而C1的POD峰值仅出现一次在第4d,但整体含量差别不显著。C2处理水平下PPO的含量整体呈现上升趋势,与C1相比差异显著;从生根诱导期到伸长期(2d-7d),C2的PPO含量成上升趋势,比同时间段C1的PPO酶含量高。三个处理的IAAO酶活性均呈上升趋势,且变化趋势基本相同,但C2处理水平下的IAAO活性在整个生长过程均比C1高。5、比较三个处理的内源激素ZT、IAA、ABA、GA3含量变化发现,在生根诱导初期需要较低浓度的ZT和GA3,以及较高浓度的IAA和ABA,试验结果表明,添加产物后的处理C2的试管苗IAA、ABA含量整体水平高于C1,而ZT、GA3的含量整体低于C1水平。
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