【摘 要】
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背景:围绝经期女性唾液分泌障碍表现为唾液分泌减少和成分改变。研究表明其发生与雌激素含量降低密切相关。氯离子通道是唾液分泌过程的原始动力,α-唾液淀粉酶是唾液中含量最多的有机物之一,雌激素含量变化是否通过影响氯离子通道和α-唾液淀粉酶参与围绝经期女性唾液分泌障碍的发生尚不清楚。目的:通过动物实验观察低雌激素状态下,下颌下腺雌激素受体,氯离子通道和α-唾液淀粉酶活性的变化,通过细胞实验观察雌激素受体G
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背景:围绝经期女性唾液分泌障碍表现为唾液分泌减少和成分改变。研究表明其发生与雌激素含量降低密切相关。氯离子通道是唾液分泌过程的原始动力,α-唾液淀粉酶是唾液中含量最多的有机物之一,雌激素含量变化是否通过影响氯离子通道和α-唾液淀粉酶参与围绝经期女性唾液分泌障碍的发生尚不清楚。目的:通过动物实验观察低雌激素状态下,下颌下腺雌激素受体,氯离子通道和α-唾液淀粉酶活性的变化,通过细胞实验观察雌激素受体GPR30对氯离子通道和α-唾液淀粉酶活性的作用。探讨雌激素通过GPR30调控氯离子分泌和α-唾液淀粉酶的活性可能的机制。方法:动物实验采用60只成体雌性SD大鼠,随机分为假手术组（SHAM）,去卵巢组（OVX）,去卵巢后雌激素治疗组（OVX+E）,每组20只。OVX组和OVX+E组行双侧卵巢切除术,恢复2周后,OVX+E组注射雌激素4周,阴道细胞脱落涂片HE染色,子宫形态观察以及放射免疫法测定雌激素含量判定去卵巢模型建立成功。免疫组化和免疫印迹检测雌激素受体（ERα,ERβ,GPR30）,氯离子通道蛋白ANO1,三磷酸肌醇受体IP3R,血管活性肠肽VIP与受体VPAC1在下颌下腺细胞的表达;免疫荧光观察ANO1和IP3R之间是否存在共表达;sAA活性检测试剂盒微量法检测组织中α-唾液淀粉酶的活性。细胞实验采用SMG-C6细胞系,设置对照组（Control）,激动剂组（G1）,拮抗剂组（G15）和先拮抗再激动组（G15+G1）四组,特异性激动和拮抗GPR30,使用免疫印迹观察ANO1、IP3R、VIP和VPAC1蛋白表达情况。结果:大鼠去卵巢后,子宫形态萎缩明显,无动情周期出现,体内雌激素水平显著降低,雌激素受体ERα和GPR30表达减少,给与雌激素治疗后前者表达未见显著增加,而后者表达恢复至对照组水平,另外ERβ表达未见明显变化。去卵巢后氯离子通道蛋白ANO1和三磷酸肌醇受体IP3R表达均显著降低,雌激素治疗后,表达升高接近对照组水平,荧光双标显示两者在腺泡细胞的细胞膜上存在共定位。去卵巢后,下颌下腺分泌的唾液淀粉酶活性也明显下降,血管活性肠肽VIP和其受体VPAC1表达亦减少,给予雌激素干预后恢复至对照组水平。在SMG-C6细胞中特异性激活GPR30受体后,IP3R,ANO1,VIP,VPAC1表达均增加,特异性拮抗GPR30后,四种蛋白表达均减少。结论:低雌激素状态下,大鼠下颌下腺细胞中GPR30表达减少,一方面可能通过介导IP3R和ANO1表达减少影响了氯离子分泌,导致唾液分泌减少;另一方面,通过介导VIP和VPAC1表达减少导致α-唾液淀粉酶活性降低,引发唾液成分改变。
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