橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析

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本文采用聚合酶链反应(PCR)法与反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法克隆到橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因的两个片段,为进一步研究橄榄星室木虱对杀虫剂抗性的分子机理奠定了基础。主要研究结果如下: 抽提及纯化橄榄星室木虱总DNA的PCR扩增并进行测序,获得橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶片段,该片段有499bp,两个外显子连在一起同意大利蜜蜂等13种昆虫相应基因的氨基酸同源性大于88%,该序列在GenBank数据库中的接受号是DQ425058。 抽提及纯化橄榄星室木虱总RNA,用一步法对橄榄星室木虱总RNA进行逆转录和PCR扩增,获得两个cDNA产物片段,它们是18S rRNA基因片段和乙酰胆碱脂酶基因片段,分别长70bp和166bp。 乙酰胆碱脂酶基因cDNA片段产物经翻译获得的氨基酸第1到第11位与家蝇等13种昆虫相应的序列相同或仅相差一个氨基酸,该序列在GenBank数据库中的接受号是DQ417582。 18S rRNA基因片段cDNA序列在23—49bp区间与其他昆虫的18s rRNA基因同源性最高;在50—70bp处各种昆虫之间有较大差别。由于测得的序列与很多昆虫的18srRNA基因序列同源,故该序列是橄榄星室木虱18S rRNA基因cDNA片段。把该基因提交给GenBank数据库,接受号是DQ425057。
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