苹果渣中苹果多酚的提取、纯化及功效研究

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为了充分利用苹果渣,开发高纯度的苹果多酚,本研究以农业废弃物—苹果渣为材料,以没食子酸为标准品研究了福林法测定苹果渣中多酚物质含量的适宜条件;采用微波辅助提取法,通过四元二次通用旋转设计确定了苹果渣中多酚的最佳提取工艺;并对经过微波辅助提取所得的苹果多酚制品与常用抗氧化剂作对比,测定了其对猪油和花生油的抗氧化性能;针对苹果多酚粗提物,探索了大孔吸附树脂对苹果多酚纯化的最佳条件;研究了Sephadex LH-20进一步纯化苹果多酚的工艺;采用高效液相色谱法测定了苹果渣多酚的部分活性成分。研究结果如下: 1、测定苹果渣提取物中苹果多酚的最优条件是反应温度25℃,反应时间120min,福林试剂10%Na2CO3体积之比1:1,测定方法的平均回收率为106.5%,RSD为0.49%,有较好的准确度和精密度。具有重复性好、所用试剂简单、操作过程方便,灵敏度高等优点,特别适宜大批样品总酚含量的测定。 2、苹果渣中苹果多酚的微波提取最优工艺:萃取时间60S,功率750W,乙醇浓度60%,料液比1:50,此时最大吸光度Ymax=0.460,苹果多酚理论提取得率可达11.93mg/g(DW),明显高于热回流及超声波提取得率。 3、苹果渣中的苹果多酚粗提物对花生油、猪油具有明显的抗氧化作用。 4、不同树脂对苹果多酚的吸附效果不同,在所选的4种大孔吸附树脂中NKA-9为苹果渣中苹果多酚初步纯化的最佳树脂材料。当供试液苹果多酚浓度为2.5mg/mL,用浓度为60%的乙醇作洗脱剂,洗脱流速为1.0mL/min时,所得苹果多酚的纯度由原来的0.97%提高到19.74%,提高了20倍,收率可达66.34%。 5、苹果多酚一次纯化浓缩液经过Sephadex LH-20后,采用分步洗脱方式,先用蒸馏水以1mL/min的流速进行洗脱,后用浓度为80%的乙醇以0.5mL/min的流速进行洗脱,收集合并多酚含量较高的部分,苹果多酚的纯度可达到84.72%。 6、高效液相色谱法测定了纯化后所得的苹果多酚制品的组分,确定了苹果渣皮中根皮素的测定方法。
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