论文部分内容阅读
海洋内生真菌Halorosellinia sp. (No.1403)和Xylaria sp. (No.2508)分离自我国南海红树林地区。Xyloketal B是从Xylaria sp. (No.2508)发酵液中分离得到的一种结构新颖的缩酮类化合物,可以作为治疗动脉粥样硬化的潜在药物。1403C是从Haloroselliniasp.(No.1403)发酵液中分离到的新型蒽醌类化合物,该化合物及其乙酰化产物能明显抑制多种肿瘤细胞系且对普通细胞毒性小。本文重点研究了xyloketal B和1403C的生物合成途径,并初步探讨了光对这两种菌生长发育及xyloketal B、1403C产量的影响。本文采用酶抑制剂法、前体喂养法研究了xyloketal B的生物合成途径。0.2 mmol/L的碘乙酰胺能够完全抑制xyloketal B的生物合成,说明xyloketal B的生物合成途径涉及聚酮途径。而丙二酸使xyloketal B的产量从5 mg/L提高至43 mg/L,表明丙二酸是xyloketal B潜在的生物合成前体。然而低浓度乙酸对产量的影响并不明显,当浓度达到0.5 mmol/L时会明显地抑制xyloketal B的合成。此结果表明在Xylaria sp. (No.2508)中,乙酰CoA羧化酶酶活不高。柠檬酸是乙酰CoA羧化酶的变构激活剂,当在发酵液中添加4mmol/L的柠檬酸时,xyloketal B的产量提高了约13倍,验证了以上假设。在研究1403C碳骨架来源的过程中,采用[1,2,3-13C3]丙二酸及[2-13C]丙二酸作为前体进行稳定性同位素标记实验,13C富集模式表示1403C碳骨架中有7个碳原子来自丙二酸的羧基碳,8个来自于亚甲基碳,一个来源于O-甲基化反应。并发现在C-6位点发生一个脱羧反应且1403C的起始单位是由丙二酰CoA在连接到聚酮合成酶(PKS)上时脱去一个羧基形成二碳起始单位。在研究光对Xylaria sp. (No.2508)生长发育影响的实验中,发现蓝光能够诱导Xylaria sp. (No.2508)形成子座。在Xylaria sp. (No.2508)摇瓶发酵培养中,我们发现红光能够促进xyloketal B的产生、白光下产量下降而蓝光作用效果不明显,表明Xylariasp.(No.2508)可能存在其它的光感应系统对xyloketal B的合成进行调控。在研究光对Halorosellinia sp. (No.1403)生长发育影响的实验中发现该菌存在能够促进菌体生长的蓝光诱导系统。而在研究光对1403C及1403C还原性产物1403B和1403R产量的影响中,我们发现红光能够促进1403C的合成,而蓝光能够抑制这三种化合物的合成。