目的:胚胎着床即准备好的胚胎在特定时间到达子宫内膜,滋养细胞完成粘附、迁移、侵袭、植入、包埋等一系列生物学行为,胚胎植入是胚胎着床的重要条件,是一个关键的多步骤过程,这一步骤涉及激素、细胞因子、粘附分子、免疫系统等的协同作用,而滋养细胞粘附和侵袭是胚胎着床的关键步骤。我们课题组前期对滋养细胞的相关研究发现,环孢素（Closphere A,CsA）可促进胚胎滋养细胞的粘附作用,而滋养细胞粘附、侵袭是胚胎着床的必要条件,因此,本课题主要通过观察滋养细胞迁移能力,滋养细胞顶端微泡大小和面积,相关因子的表达情况,研究CsA对围着床期胚胎滋养细胞粘附和侵袭的作用及滋养细胞顶端微泡及相关因子在此过程中的影响。方法:促排、胚胎收集:将饲养至3周的雌鼠超促排后合笼、查栓、收集胚胎,收集的2细胞胚胎行序贯培养即卵裂期胚胎用G1培养液培养至D3,再将不同浓度的CsA加入至G2囊胚期培养液,并设置分组:对照组为CsA浓度0umol/L、实验组为CsA浓度1umol/L;迁移实验:胚胎续贯培养至7.5dpc时显微镜下观察胚胎铺展面积。电镜实验:分别收集D5、D6胚胎经2.5%的戊二醛固定过夜,琼脂包埋、酒精梯度脱水、树脂包埋、切片、铅染、铀染、烘干后行电镜观察滋养细胞形态学变化及滋养细胞顶端微泡的变化情况。q-PCR:收集D5.5胚胎提总RNA,q-PCR测胚胎的LIF、FGF、Vim的mRNA表达量。免疫荧光:收集5.5dpc胚胎分别用LIF、FGF、Vim抗体孵育,用DAPI进行胚胎细胞核染色,激光共聚焦显微镜观察LIF、FGF、Vim表达情况并用软件分析其相对表达量后进行统计。结果:通过测量胚胎滋养细胞在LN包被的皿底的铺展面积,发现实验组的面积为对照组的1.75倍,有统计学差异;电镜观察D5胚胎滋养细胞顶端微泡,实验组的微泡数量为对照组的3.93倍,有统计学差异,实验组微泡平均面积为对照组的1.38倍;电镜观察D6胚胎滋养细胞顶端微泡,实验组胚胎滋养细胞顶端微泡的数量为对照组的1.33倍,实验组微泡平均面积为对照组的3.43倍,有统计学差异;比较D5-D6微泡数量和微泡平均面积的变化,对照组的微泡平均面积D5为D6的3.6倍,微泡个数D5与D6无变化;实验组的微泡平均面积D6为D5的8.93倍,微泡个数D5为D6的2.9倍。清晰可见微泡膜破裂,内容物释放的过程;q-PCR验证mRNA表达量,实验组LIF较对照组无明显差异,实验组FGF的mRNA表达量较对照组增加1.65倍,有统计学差异,实验组VIM较对照组无明显差异,有下降趋势;激光共聚焦发现LIF、FGF、VIM均在胞质中表达,软件测量相关因子的相对表达量,实验组LIF荧光亮度为对照组的4.72倍,实验组的FGF的荧光亮度较对照组增强3.828倍,实验组的VIM的荧光亮度较对照组增强3.8倍,无统计学意义,与q-PCR结果大致一致。结论:环孢素可增加围着床期胚胎绒毛前滋养细胞的侵袭和迁移能力;环孢素对围着床前滋养细胞侵袭性的影响与滋养细胞顶端微泡的活性有关;环孢素对围着床期滋养细胞侵袭性的影响与LIF、FGF、VIM等因子通路有关;