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目的:本研究通过Fad3转基因小鼠体内合成n-3多不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acid,n-3 PUFA),旨在评估n-3 PUFA对高脂饮食诱导的肥胖小鼠氧化应激、炎症反应和脂质代谢的影响。方法:1.C57BL/6小鼠和Fad3转基因小鼠分为 4 组,分别为 C57BL/6C 组(n=10),C57BL/6H 组(n=10),FAD3C 组(n=10)和FAD3H 组(n=10)。C57BL/6C 组和 FAD3C 组给予 10%kcal 普通饮食,C57BL/6H 组和FAD3H组给予45%kcal高脂饮食,饲喂40周。2.小鼠处死后取肝脏组织,检测MDA、SOD、GSH、GSSG、GSH/GSSG、NOX2指标,评估小鼠氧化损伤以及抗氧化状态。3采用Western Blotting检测炎症信号通路相关蛋白(NF-κB p65和p-NF-κB p65)表达水平,实时定量PCR检测IL-6、TNFα的mRNA表达水平。4.采用Western Blotting检测AMPK、p-AMPK、SREBP1-c以及p-ACC蛋白表达;实时定量PCR检测脂质代谢相关因子PPARα、CPT-1、ACOX和FAS的mRNA表达。结果:1.C57BL6H组的体重、体脂明显高于其他三组(P<0.01)。食物摄入量在四组间没有差异。2.肝脏氧化应激相关参数:C57BL6H组MDA含量明显高于其他三组(P<0.05),而FAD3H组MDA含量显著低于其他三组(P<0.05)。C57BL6H组SOD活性明显低于其他三组(P<0.05),C57BL6C、FAD3C、FAD3H三组之间没有明显差异。C57BL6H组GSH水平较C57BL6C和FAD3H组明显降低(P<0.01),而FAD3H组和C57BL6C组之间无明显差异。四个组之间GSSG水平没有明显差异。C57BL6H组的GSH/GSSG水平明显低于其他三组(P<0.05)。NOX2蛋白表达在C57BL6C组和C57BL6H组之间没有明显差异,而FAD3C组和FAD3H组显著降低(P<0.01)。3.肝脏炎症信号通路相关因子的表达:p65蛋白表达水平在四个组之间没有明显差异。C57BL6H组p-p65蛋白表达明显高于其他三组(P<0.05)。FAD3H 组 p-p65 蛋白表达明显低于 C57BL6H 组(P<0.05)。C57BL6H 组TNFα的mRNA表达水平显著高于其他三组的表达水平(P<0.05)。FAD3H组IL-6的mRNA表达水平明显低于其他三组(P<0.05)。4.肝脏脂质代谢相关基因表达:C57BL6H组p-AMPK蛋白表达水平显著低于C57BL6C组(P<0.05),而FAD3H组较C57BL6H组p-AMPK蛋白表达明显增加(P<0.05);四个组之间AMPK蛋白表达无明显差异。p-AMPK/AMPK与p-AMPK表达趋势相同。C57BL6H组PPARα mRNA表达明显低于其他三组(P<0.01)。FAD3C组和FAD3H组PPARα mRNA表达显著增加(P<0.05)。FAD3C组的CPT-1 mRNA表达水平明显高于其他三组(P<0.01)。与其他三组相比,C57BL6H组的ACOX mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。C57BL6H组SREBP1-c蛋白表达和FAS的mRNA表达明显高于其他三组,而FAD3H组较C58BL6H组表达显著降低(P<0.05)。C57BL6H组p-ACC明显低于其他三组(P<0.05)。相比于C57BL6H组,FAD3H组p-ACC表达明显增高(P<0.05)。结论:1.n-3 PUFA可以降低高脂食物诱导的肥胖小鼠体重和体脂。2.n-3 PUFA可以通过下调NOX2表达,预防NADPH氧化酶介导的ROS增加;降低MDA含量,减少肝脏氧化应激;上调抗氧化系统,如增加SOD、GSH、GSH/GSSG表达,提高肝脏抗氧化能力。3.n-3 PUFA可以通过下调炎症信号通路相关因子,如p65、IL-6、TNFα的表达,减轻炎症刺激。4.n-3 PUFA通过激活AMPK,下调 SREBP1-c、FAS 表达和上调 p-ACC、PPARα、ACOX、CPT-1 表达,改善肝脏脂质代谢。