蓝狐是珍贵的特种经济动物,其毛皮性能优良,可制作各种高档裘皮产品。矿物质营养是动物机体不可或缺的一类营养物质,其中钙、磷和锰是动物机体必需的矿物质营养,具有广泛的生物学功能,参与骨骼发育并且与蛋白质、脂肪和碳水化合物的代谢密切相关。毛皮动物蓝狐钙、磷和锰营养研究报道很少,适宜我国本土化的蓝狐各个不同生理时期的钙、磷和锰适宜需要量没有标准。此外,钙、磷和锰对蓝狐生产性能产生多大的影响尚不明确,评价蓝狐钙、磷和锰营养生物学利用率的敏感指标有待探讨。本研究的目的是通过饲养试验、屠宰试验及转录组学方法评估饲粮钙、磷和维生素D₃水平对育成期和冬毛期蓝狐生长性能、营养物质消化率、生化指标和毛皮质量的影响以及影响机制,在此基础之上,进一步分析饲粮锰来源和水平对育成期蓝狐生产性能的影响,为科学合理搭配蓝狐日粮,确定适宜的钙、磷和锰添加水平提供科学支持。试验一饲粮钙磷及维生素D₃对育成期蓝狐生产性能的影响试验采用3×3双因素试验设计,选取135只60日龄育成期的蓝狐公狐（平均体重±标准差,1.93±0.27 kg）随机分成9组,每组15个重复,每个重复1只。钙磷比恒定为1.5/1,9组饲粮分别包含3个钙水平0%、0.4%和0.8%,和3个维生素D₃水平1000、2000和4000IU·kg^-1。基础饲粮中钙与维生素D₃水平分别为0.8%与327 IU·kg^-1。所以9种饲粮的钙与维生素D₃水平分别为0.8%与1327 IU·kg^-1、0.8%与2327 IU·kg^-1、0.8%与4327 IU·kg^-1、1.2%与1327 IU·kg^-1、1.2%与2327 IU·kg^-1、1.2%与4327 IU·kg^-1、1.6%与1327 IU·kg^-1、1.6%与2327 IU·kg^-1、1.6%与4327 IU·kg^-1。试验预饲期10 d,试验期60 d。该部分试验旨在研究饲粮钙磷和VD₃水平对育成期蓝狐生长性能、营养物质表观消化率及氮代谢的影响。结果表明:（1）维生素D₃水平对育成期蓝狐的生长性能有显著影响（P<0.05）;（2）钙的水平对蛋白和碳水化合物的消化率有正向线性影响（P<0.05）;（3）随着钙添加水平的升高脂肪消化率先升高后降低（P<0.05）;（4）钙水平线性增加了净蛋白利用率但降低了钙磷的消化率（P<0.05）;（5）饲粮钙和维生素D₃水平对育成期蓝狐的食入氮、氮沉积、净蛋白利用率和蛋白质生物学价值有显著的交互作用（P<0.05）。高剂量的钙对维生素D₃在氮沉积和蛋白质生物学价值上有相互促进作用（P<0.05）;（6）在粪磷方面,高剂量的钙对维生素D₃有拮抗作用（P<0.05）。育成期固定为1.5/1的钙磷比条件下,育成期蓝狐饲粮中添加钙0.4-0.8%、维生素D₃2000 IU·kg^-1时即总钙1.2-1.6%、维生素D₃2327 IU·kg^-1较为适宜。试验二饲粮钙磷及维生素D3对冬毛期蓝狐生产性能的影响试验采用3×3双因素试验设计,选取135只120日龄冬毛期蓝狐公狐（平均体重±标准差,4.03±0.25 kg）随机分成9组,每组15个重复,每个重复1只。钙磷比恒定为1.4/1。9组饲粮钙与维生素D3水平同试验一。试验预饲期10天,试验期87天。该部分试验旨在研究饲粮钙磷和维生素D₃水平对冬毛期蓝狐生长性能、营养物质表观消化率、氮代谢和皮张的的影响。结果表明:（1）随着钙水平的增加冬毛期蓝狐的生长性能线性下降（P<0.05）;（2）钙水平降低了营养物质消化率（P<0.05）;（3）钙水平提高了粪钙粪磷含量降低了磷的消化率（P<0.05）;（4）饲粮钙磷和维生素D₃的交互作用对钙磷消化率有显著影响（P<0.05）;（5）随着饲粮钙添加水平的增加,蓝狐体长显著降低（P<0.05）,饲粮钙添加水平为0%时,蓝狐体长最大;（6）维生素D₃水平对蓝狐体长和皮长均无显著影响（P>0.05）;（7）随着饲粮钙添加水平的增加,蓝狐胫骨钙含量显著提高（P<0.05）,饲粮钙添加水平为0.8%时,蓝狐胫骨钙含量最高;（8）维生素D₃水平对蓝狐胫骨灰分含量有显著影响（P<0.05）;（9）饲粮钙的添加显著降低了心脏和肝脏指数（P<0.05）。冬毛期固定为1.4/1的钙磷比条件下,冬毛期蓝狐饲粮中添加钙0-0.4%、维生素D₃1000 IU·kg^-1时即总钙0.8-1.2%、维生素D₃1327IU·kg^-1较为适宜。试验三饲粮钙磷对蓝狐骨髓影响的转录组学分析以本试验冬毛期蓝狐维生素D₃最适宜添加量为1000 IU·kg^-1的结果为依据,选取试验二中维生素D₃添加量为1000 IU·kg^-1时3个钙水平0%、0.4%和0.8%的每组3只蓝狐为研究对象。饲养试验结束后,屠宰,取胫骨的骨髓进行转录组测序及分析。该部分试验旨在揭示饲粮钙磷对蓝狐生产性能影响的部分分子机制。结果显示,对Unigene进行功能注释,包括与NR、Swiss-Prot、KEGG、COG、KOG、GO和Pfam数据库的比对,共获得32,499条Unigene的注释结果。基于基因在不同样品中的表达量,识别差异表达基因。利用edge R的程序分析,其中两个参数分别为FDR=0.05和FC=2,结果发现转录组中有差异基因1085个,其中上调基因650个,下调基因435个。对差异表达基因进行模式聚类、功能注释以及富集性分析。分析结果表明,GO数据库的样品组间差异表达基因进行富集分析,发现RNA-引导的DNA生物合成过程、果糖1,6酮糖代谢过程、甘油分解过程、液泡质子转运V型ATP酶复合物组装等功能是富集分析中显著性最高的几个功能。在COG分类图中差异基因多与翻译后修饰、蛋白质周转和分子伴侣等功能相关。KEGG通路富集分析发现差异基因在过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR）信号通路上富集的基因最多。利用q PCR法对10个基因表达水平验证。结果表明q PCR法与转录组分析结果基本一致。试验四饲粮不同锰来源及水平对育成期蓝狐生产性能的影响在确定钙磷添加量的基础上,试验分为7组,设2种锰源（硫酸锰和氨基酸螯合锰）和3个锰水平（20、40、60 mg/kg）,1个对照组,选择56日龄健康、体重相近的雄性蓝狐70只,随机分成7组,每组10个重复,每个重复1只蓝狐,探讨锰水平和锰源对蓝狐生长性能和免疫指标影响。结果表明:（1）随着饲粮锰添加水平增加,育成期蓝狐平均日采食量、日增重、料重比、干物质摄入量及干物质消化率在组间差异不显著（P>0.05）;（2）60 mg/kg有机锰添加组的粗蛋白、粗脂肪和P消化率最高（P<0.05）,但与有机螯合锰40 mg/kg添加组无显著性差异。综上所述,本研究得出以下结论:（1）本研究发现育成期固定为1.5/1的钙磷比条件下,育成期蓝狐饲粮中添加钙0.4-0.8%、维生素D₃2000 IU·kg^-1时即总钙1.2-1.6%、维生素D₃2327 IU·kg^-1较为适宜。（2）冬毛期固定为1.4/1的钙磷比条件下,冬毛期蓝狐饲粮中添加钙0-0.4%、维生素D₃1000 IU·kg^-1时即总钙0.8-1.2%、维生素D₃1327 IU·kg^-1较为适宜,能提高蛋白质和磷的利用率降低粪钙和粪磷的排出量,从而改善环境。（3）饲粮钙磷水平影响蓝狐生产性能分子机制中,功能基因涉及RNA-引导的DNA生物合成过程、果糖1,6酮糖代谢过程、甘油分解过程、液泡质子转运V型ATP酶复合物组装等;（4）蓝狐育成期饲粮1.5/1的钙磷比条件下,总钙为1.40%时,有机锰的适宜添加量为40mg/kg。