亚麻籽油及其功能成分α-亚麻酸对肠道菌群调节作用的研究

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亚麻籽油中富含α-亚麻酸,α-亚麻酸是人体所不能合成的三种必需脂肪酸之一,具有多种优良的生理功能。肠道环境是人体最大的微生态系统,肠道菌群与人体健康密切相关。关于亚麻籽油和α-亚麻酸对肠道菌群的调节作用,目前尚无相关的研究报道。本文通过采用体外动物粪便厌氧培养体系,研究亚麻籽油及其功能成分α-亚麻酸对肠道菌群结构和肠道益生菌的影响,为阐明亚麻籽油及α-亚麻酸作为功能因子改善肠道微生态的作用和机理,提供理论和实验依据。主要研究结果如下:(1)利用单因素、响应面法对超临界CO2萃取亚麻籽油的工艺进行优化,得出最优萃取条件为萃取时间4.58h,萃取温度51℃,萃取压力31MPa,在此条件下亚麻籽油萃取率为23.95%。通过GC-MS分析亚麻籽油的化学组分,结果表明本研究超临界萃取的亚麻籽油中α-亚麻酸相对含量为75.22%,不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比值为9.33,远高于采用冷榨工艺、溶剂浸出工艺制备的两种市售油。(2)采用体外动物粪便厌氧培养体系,研究添加三种不同剂量亚麻籽油、α-亚麻酸对正常膳食大鼠、高脂膳食大鼠肠道菌群结构的调节作用。结果表明,亚麻籽油、α-亚麻酸能促进肠道益生菌生长,抑制肠道有害菌增殖,并可提高肠道菌群发酵液中的短链脂肪酸含量。采用Illumina-MiSeq高通量测序技术分析方法,PCA、PCoA、NMDS和聚类分析结果均表明添加亚麻籽油或α-亚麻酸对肠道菌群结构具有明显影响,尤其对高脂膳食大鼠肠道菌群结构的影响更为明显。添加亚麻籽油可提高肠道益生菌Lactobacillus、Phascolarctobacterium的丰度,降低Parabacteroides、Escherichia/Shigella、ClostridiumXIVa的丰度;添加α-亚麻酸可提高肠道益生菌Bacteroidetes、Lactobacillus、Phascolarctobacterium的丰度,降低Firmicutes、Enterococcus、ClostridiumXIVa的丰度,提高拟杆菌门/厚壁菌门的比值。结果表明亚麻籽油或α-亚麻酸具有调节肠道菌群结构的功能,可促进肠道益生菌的增殖,对高脂膳食引起的异常肠道菌群结构具有明显的恢复作用。(3)通过细菌粘附性实验,研究三种剂量α-亚麻酸对两种肠道益生菌(嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌)与两种结肠上皮细胞(结肠腺癌细胞Caco-2细胞、正常结肠上皮细胞NCM460细胞)粘附性的影响。通过革兰氏染色镜检和细菌粘附率分析,结果表明中、高剂量α-亚麻酸可促进两种益生菌对Caco-2细胞和NCM460细胞的粘附作用,该作用有利于益生菌持续发挥益生活性。
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