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目的岩陀来源于虎耳草科鬼灯檠属多基原植物(羽叶鬼灯檠、西南鬼灯檠或七叶鬼灯檠)的干燥根茎,为西南地区多民族习用药材。形态学方面的高度相似性导致三种鬼灯檠植物来源的岩陀药材均在市场流通并混淆使用,给临床用药安全带来极大困扰。因此,鉴于传统形态学分类的局限性,利用DNA条形码分子鉴定技术和UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,鉴别不同来源的岩陀药材,为三种鬼灯檠的品种鉴别提供方法和依据很有必要。方法(1)本研究以鬼灯檠属的3个种59份样本为材料,对五条DNA条形码序列ITS、ITS2、rbc L、mat K、psb A-trn H的鉴别能力进行评价,并尝试筛选出适合该属物种鉴定的DNA条形码单片段序列或组合序列;(2)采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对三种鬼灯檠植物来源岩陀药材进行化学成分鉴定,以期望为其它多基原药材鉴别提供参考依据。结果(1)五条候选序列扩增情况如下:ITS(98.75%)>ITS2(97.5%)>rbc L(95%)>mat K(92.5%)=psb A-trn H(92.5%);mat K序列测序成功率最小为58.75%,其它四条序列一次测序成功率均在70%以上。序列特征性分析发现,五条候选序列保守位点数最高的是rbc L序列,变异位点数最高的是psb A-trn H序列。对比五条候选序列的GC%含量可知,ITS2序列GC%含量最高,为51.6%,psb A-trn H序列GC%含量最低,为27.5%。五条候选序列种内种间遗传距离平均值最高的是psb A-trn H序列,种内种间遗传距离平均值最小的是mat K序列,说明psb A-trn H序列变异性最高,mat K保守性最大,变异性最小。Barcoding gap检测结果显示,五条候选序列均未出现明显的Barcoding gap,无论核基因片段还是叶绿体基因片段,种内种间遗传差异分布均呈现重叠现象,但psb A-trn H种内种间分布重叠概率最低。两两序列种内种间wilcoxon非参数秩和检验结果显示,psb A-trn H序列种内种间遗传差异显著高于其他四条候选序列,rbc L序列遗传差异性最小。对鬼灯檠属3个物种的五条候选序列利用Blast1和NJ建树方法考察不同序列对物种的鉴别效率,发现psb A-trn H对物种的鉴别成功率为100%,其他四条序列均低于50%。对四条组合序列(psb A-trn H+ITS、psb A-trn H+rbc L、psb A-trn H+mat K、ITS2+mat K+rbc L序列)进行Barcoding gap检验、NJ建树,发现四条组合序列均未出现明显Barcoding gap,种内种间遗传差异分布均存在部分重叠,NJ建树发现三条组合序列(psb A-trn H+ITS、psb A-trn H+rbc L、psb A-trn H+mat K)与单序列psb A-trn H鉴别结果一致。(2)采用UPLC-Q-TOF-MS/MS方法对三种鬼灯檠来源的岩陀药材进行化学成分分析,发现:并没食子酸,儿茶素-7-O-β-D-葡萄糖苷,槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷,槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷,槲皮素,香叶基-1-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷只存在于七叶鬼灯檠中,羽叶鬼灯檠和西南鬼灯檠中并未发现;3,5-二-O-没食子酰基-表儿茶素只存在于七叶鬼灯檠和羽叶鬼灯檠中,西南鬼灯檠中并未发现。结论(1)从种内种间遗传差异程度,NJ建树,物种鉴别成功率为评价指标,我们推荐叶绿体psb A-trn H序列作为3种鬼灯檠属植物的标准DNA条形码;(2)三种鬼灯檠来源的岩陀药材化学成分存在差异,可以作为该基原药材鉴别方法之一。