天然免疫是脊椎动物和无脊椎动物体内最原始的抵御外来病原入侵的一种防御保护机制,通过模式识别受体（PRR,pattern recognition receptors）起作用,以识别微生物表面特定的碳水化合物。在免疫系统中,模式识别受体是无脊椎动物免疫应答中发挥重要作用的分子,多种形式的PRRs能够识别病原体细胞表面的特异性成分,这些成分被称为病原相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns,PAMPs）。PRR与PAMP的初始相互作用引发了一系列先天免疫反应。凝集素是PRRs的一个重要亚群,可以识别特定的碳水化合物。近年来研究发现,intelectin（ITLN）是一种新型凝集素-X型凝集素,最早在非洲爪蟾的皮质颗粒素（XL35）中发现,后来研究发现在小鼠小肠的潘氏细胞中大量表达并命名为“intelectin”。随后相继在哺乳动物、鱼类、两栖动物、头索动物、尾索动物、后口动物和无脊椎动物中相继发现有intelectin的存在。本实验以我国最常见的淡水鱼鲤鱼为研究材料,利用生物信息学相关技术,从鲤鱼基因组同源序列检索得到编码intelectin的c DNA,并将其命名为cITLN。通过对鲤鱼cITLN基因进行分析可知:cITLN序列由296个氨基酸组成,约63%与人相似,主要由N末端的纤维蛋白原结构域（Fre D-domain）和C末端的intelectin-domain构成,有相关的钙离子结合位点,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有钙离子依赖性的凝集作用。利用qPCR方法,检测鲤鱼正常状态和嗜水气单胞菌刺激状态下各组织的表达模式。实验结果表明cITLN在鲤鱼各组织中广泛表达,在嗜水气单胞菌刺激后,肠道对细菌的免疫反应最为迅速,在3 h表达量上调,而脾脏、肝脏和头肾组织对细菌的免疫反应较为缓慢,在6 h时表达量上调。cITLN在刺激后表达量的上调,我们猜测cITLN可能参与了鲤鱼体内由细菌感染引起的免疫防御,在鲤鱼的天然免疫中发挥作用。为了进一步探究鲤鱼cITLN的功能,通过诱导得到cITLN蛋白,在细菌凝集实验、细菌结合实验和多糖结合实验等方面进行了cITLN体外功能的验证。细菌凝集实验表明,重组cITLN依赖于钙的细菌凝集,凝集革兰氏阳性菌的能力强于革兰氏阴性菌。细菌结合实验同样显示:cITLN结合革兰氏阳性菌的能力强于革兰氏阴性菌,在添加钙离子和不添加钙离子两种条件下存在明显差异,钙离子可以增加重组蛋白和细菌的结合程度。另外通过ELISA技术分析cITLN与多糖结合,结果显示:重组cITLN与肽聚糖（PGN）的亲和性高于脂多糖（LPS）,并且钙离子同样会促进结合。以上实验结果表明,鲤鱼cITLN在动物的天然免疫中能识别细菌细胞壁特异性成分,从而引起细菌的凝集,参与生物体内的免疫防御。通过对鲤鱼cITLN进行生物信息学分析,初步构建鲤鱼细菌刺激模型,分析cITLN在鲤鱼体内的表达模式,以及该蛋白在体外与细菌的相互作用,有利于我们对intelectin基因家族参与免疫防御机制的理解,为我们进一步全面认识鲤鱼cITLN在天然免疫中的作用提供了参考与依据。