目的:系统性硬皮病（SSc）患者在临床上可出现不同的表现,其中包括微血管损伤、自身免疫异常、多器官血管病变和纤维化,但其中的发病机制还不完全明确。最近有研究表明,SSc患者血清中抗血管紧张素Ⅱ型受体（AT1R）和内皮素Ⅰ型A受体（ETAR）的自身抗体显著升高,并且这些自身抗体与疾病并发症和死亡率相关。我们课题组之前用人AT1R或者ETAR的蛋白免疫小鼠,小鼠出现类似SSc的部分临床症状,包括皮肤和肺部炎症反应、皮肤纤维化。在这项研究里,我们的主要目的包括两个方面。一方面,我们想检测针对AT1R的T细胞免疫反应在小鼠模型里的作用,探索是否可以利用免疫含有T细胞抗原表位的AT1R多肽构建新的小鼠模型。另一方面,我们想利用CD4+T细胞缺陷小鼠和CXCR-1敲除小鼠来进一步探讨CD4+T细胞和炎症趋化因子受体CXCR-1在SSc小鼠模型发病机制中的作用。方法:为了预测AT1R中的T细胞抗原表位,我们利用NetMHCⅡpan3.2来分析AT1R和ETAR蛋白序列,从而找出其中能够被C57BL/6小鼠MHCⅡ结合的位点。为了研究针对AT1R中T细胞反应的作用,我们用脚掌和腹部皮下两种不同的免疫方式对C57BL/6小鼠进行免疫,所免疫的抗原为含有T细胞抗原表位的AT1R149多肽。在第一次免疫后,间隔2周再加强免疫一次,最后在第三周取小鼠肺、皮肤、肾、心进行组织化学分析。在以上免疫模式能够诱导部分疾病症状的基础上,我们再通过多次免疫的方法对小鼠模型进行优化,从而得到一个稳定的多肽诱导的SSc小鼠模型。为了研究CD4+T细胞和CXCR-1在SSc小鼠模型里的作用,我们对CD4+T缺陷小鼠和CXCR-1敲除小鼠进行免疫,对照组为野生型C57BL/6小鼠。在免疫8周后,小鼠被处死,然后收集血液和肺组织进行检测分析。结果:利用NetMHCⅡpan3.2软件的预测结果表明,在AT1R蛋白的第149位氨基酸位点上有一个较强的T细胞抗原表位,而且在ETAR蛋白相应的位置也同样有一个T细胞抗原表位,所以我们选取并合成了 AT1R149多肽。通过对C57BL/6小鼠进行不同方式的免疫实验,我们发现通过脚掌皮下方式免疫AT1R149多肽能够诱导较为明显的肺部炎症表现,但其它组织并没有异常。在多次重复免疫实验中,免疫AT1R149多肽能够让小鼠获得更加严重和稳定的肺部炎症,但皮肤、心、肾组织中未出现炎症反应。通过对小鼠血清抗体检测分析发现,实验组和对照组小鼠针对AT1R的血清抗体水平较低,而且相差不大,说明小鼠没有产生针对AT1R蛋白的特异性抗体反应。在对免疫AT1R149多肽后,野生型C57BL/6小鼠肺部有明显的炎症浸润,而CD4+T细胞缺陷小鼠肺部仅有少量炎症浸润表现,两组小鼠的肺部炎症程度有着非常显著的差别。在对CXCR-1敲除小鼠和野生型C57BL/6小鼠进行AT1R149多肽免疫后,野生型小鼠的肺部炎症的严重程度显著地高于CXCR-1敲除小鼠。结论:我们的研究表明,AT1R149多肽是致病性的T细胞抗原表位,可以诱导小鼠肺部炎症反应,能部分模拟SSc的临床表现,这些结果表明针对AT1R的T细胞免疫反应在SSc的发病过程里起到了重要的作用。而且,CD4+T细胞和CXCR-1在AT1R149多肽免疫诱导的小鼠模型的发病机制里起到了关键的作用。