陕北苹果树根际根内细菌多样性及其促生特性研究

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苹果(Malus domestica),隶属于蔷薇科苹果亚科苹果属植物,因其较强的适应能力以及较高的经济效益,已在陕北地区广泛种植。目前,对陕北苹果的相关研究,大多集中在苹果种植、修剪、施肥、病虫害防治等方面,缺乏对陕北苹果树根内根际细菌多样性及其形成机制等方面的研究。本研究以陕北4个不同产地的苹果树根和根际土为研究材枓,采用Illumina Mi Seq高通量测序技术对苹果树根际根内细菌群落结构组成进行分析,并通过小麦盆栽试验对从苹果树根际根内获得的细菌进行促生特研究。主要研究结果如下:1、对苹果树根内生细菌16S r DNA V3+V4区测序结果进行分析,结果发现:宝塔区(BT)分组内各样品的优势菌属为假单胞菌属(Pseudomonas)、节杆菌属(Arthrobacter)、链霉菌属(Streptomyces)、农杆菌属(Agrobacterium)、贪噬菌属(Variovorax);洛川县(LC)分组内各样品的优势菌属为节杆菌属(Arthrobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)、诺卡氏菌科(Nocardioidaceae)中的未定属、链霉菌属(Streptomyces)、诺卡氏菌属(Nocardioides);宜川县(YC)分组内各样品的优势菌属与LC分组内各样品的优势菌属种类相同,但其相对丰度存在一定的差异;延长县(YS)分组内各样品的优势菌属为假单胞菌属(Pseudomonas)、节杆菌属(Arthrobacter)、黄杆菌属(Flavobacterium)、链霉菌属(Streptomyces)、叶杆菌属(Phyllobacterium)、农杆菌属(Agrobacterium)、贪噬菌属(Variovorax)。对4个产地苹果根内生细菌的互作分析发现,根内存在显著性关系的菌属间相关性较为复杂。对不同产地苹果树土壤因子与根内生细菌进行环境因子关联分析,结果发现影响不同产地苹果根内生细菌分布差异的主要因素为p H,这表明苹果根内生细菌的分布与土壤的理化因子存在相关性。2、不同产地苹果根际细菌测序结果显示:4个分组根际优势细菌菌属丰度最高的均为节杆菌属(Arthrobacter),;其他共有且丰度较低的包括Gaiellaceae科中的未定属、酸杆菌纲(Acidobacteria)中的未定属、热微菌纲(Thermomicrobia)中的未定属、地嗜皮菌科(Geodermatophilaceae)中的未定属、芽孢杆菌属(Bacillus)和微球菌科(Micrococcaceaeke)中的未定属等,且不同产地苹果根际细菌丰度分布存在较大差异。对4个产地苹果根际细菌的互作分析发现,根际存在显著性关系的菌属间相关性较根内复杂。不同产地苹果树土壤因子与根际细菌的环境因子关联分析发现,p H、有效磷、硝态氮是影响不同产地苹果根际细菌分布差异性的主要因素,其中,有效磷和有机质对LC根际细菌菌群的分布有显著性影响。3、从陕北不同产地苹果树根和根际土中分离到131株细菌。其中溶磷效果较好的菌株共13株,占总分离菌株的10.68%;产铁载体效果较好的有24株,占总分离菌株的18.32%。大部分具有促生特性的菌株对一种或者多种指示菌均有抑制作用,其中LC-19的抑制作用最好。对具有促生特性的菌株进行16S r DNA测定和系统发育学分析结果显示:芽孢杆菌属和假单胞菌属占的比例最大。4、将每项促生特性最好的菌株挑选出来,共计4株,按单菌和多菌接种方法进行促生试验。各促生菌株小麦盆栽试验结果表明,相对于对照组,各组处理对小麦幼苗的生物量均有促生影响。结果显示,对小麦幼苗株高、鲜重、根长、叶绿素含量促生效果最好的单株菌分别为YC-31(W)、LC-22(Y)和LC-2(Z),较对照组分别增加了21.02%、70.01%、71.32%、17.22%;多菌接种对小麦幼苗的株高、鲜重、根长、叶绿素含量促生效果最好的组合分别为WXY、WXZ、XYZ,较对照组分别增加了28.55%、96.15%、70.19%、41.31%。总体上多株菌接种的促生效果更好。
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