磺胺嘧啶(Sulfadiazine,SD)是人工合成的抗菌药物,具有抗菌谱广、价廉、使用方便的特点,被广泛用于畜牧业生产中。同时磺胺嘧啶药物具有诸多副作用,它可在动物体内残留,并通过动物源性食品借食物链以低剂量传递,直接威胁到人类身体健康。检测SD残留的方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、联用技术、毛细管电泳法和免疫化学测定法等。免疫学分析技术以其灵敏、特异、快速、简便等优点在药物残留检测领域已被广泛应用。本研究内容主要包括SD人工抗原的合成;抗SD单克隆抗体(Monoclonal Antibody, mAb)制备;SD残留检测试剂盒研制和SD残留胶体金试纸研制等方面。通过分析SD分子结构和免疫原性,采用重氮化法将SD偶联于牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA),合成人工免疫原BSA-SD和包被抗原OVA-SD,通过紫外扫描、SDS-PAGE和免疫小鼠后抗血清的ELISA鉴定,证明BSA-SD和OVA-SD偶联成功。用BSA-SD免疫BALB/c小鼠后,应用细胞融合技术筛选出1株高亲和力、高特异性杂交瘤细胞株(6B5-E4)。用体内诱生腹水法制备SD mAb。竞争ELISA测定其IC50为1.155μg/L,与磺胺甲基嘧啶(SM1)的交叉反应性为0.8%,与其它磺胺类同系物的交叉性均小于0.1%。应用SD mAb研制出SD残留竞争ELISA试剂盒,灵敏度为0.25μg/L,线性检测范围为0～4μg/L;试剂盒对尿样的平均回收率为118.5%;对奶样的平均回收率为81.05%;对肉样的平均回收率为88.4%。研制的SD残留胶体金试纸(SD-Strip),机读检测限为2μg/L,目测检测限为10μg/L。两种产品均具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SD残留快速检测的推广应用。