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目的:众所周知,大电导钙激活钾通道(BKCa)可以将人体不同组织细胞内的钙离子信号和细胞兴奋性相联系,这种生理功能在调节人体的血液流动、尿液排出、免疫应答等多种生命活动中具有极其重要的作用。BKCa通道是人体血管平滑肌细胞膜上的主要离子通道,在血管舒缩功能调控中起着至关重要的作用。BKCa通道由4个a亚基与具有调节功能的b亚基组成,其中b亚单位是BKCa通道在人体血管平滑肌细胞上最为重要的辅助亚单位,是通道蛋白执行其生理功能的关键性因素之一,如果b亚单位出现生理功能异常,就可能引起多种心血管疾病（如高血压等）。BKCa通道蛋白在内质网合成、高尔基体加工之后,还需经过一系列复杂的转运机制并组装到质膜上,才能发挥其生理功能。小G蛋白家族成员中的Rab在质膜内侧及多种胞内囊泡结构中存在,具有调节细胞信号转导、囊泡转运和离子通道活动等生理功能。结合既往的研究,提示Rab和BKCa通道蛋白可能存在某种相互联系,但是全面深入的研究甚少,为了更好的研究BKCa通道蛋白的调节机制,我们选取了Rab5作为研究对象,展开实验,探讨小G蛋白Rab5对HEK293细胞大电导钙激活钾(BKCa)通道的影响。方法:根据以往的研究经验,我们选用的实验细胞为人胚肾293细胞系。首先将含有人血管平滑肌BKca通道a亚单位（hSlo1）的Flag和GFP双标记表达质粒（Flag-hSlo1-GFP）使用脂质体转染法和不同形式的Rab5表达质粒（野生型WT,显性负向型DN,持续激活型CA）转染至培养的HEK293细胞,使用膜片钳技术、Western blotting和流式细胞术,研究小G蛋白Rab5对BKCa通道的细胞宏观电流、BKCa通道的膜蛋白在HEK293细胞膜上表达水平和BKCa通道的转运蛋白的影响。结果:实验结果表明,表达在HEK293细胞上的大电导钙激活钾(BKCa)通道和天然BKCa通道几乎具有相似的电生理学特性,膜片钳实验表明在全细胞构型下,当细胞膜电位（Vm）达到+60mV时,Rab5 WT和Rab5 CA可以分别增加BKca通道宏观电流密度由49.19±3.76pA/pF增加到68.38±5.33pA/pF（P<0.05,n=6）和87.16±3.79pA/pF（P<0.05,n=6）。而Rab5DN减少BKca通道宏观电流密度,由49.19±3.76pA/pF减少到34.68±3.37pA/pF（P<0.05,n=6）。Western blotting实验结果显示,Rab5 WT和Rab5 CA增加BKCa通道蛋白在HEK293细胞膜上的表达水平,相对表达量分别是对照组的1.24±0.08倍（Rab5 WT）和1.42±0.13倍（Rab5CA）（P<0.05）,而Rab5 DN减少BKCa通道蛋白在HEK293细胞膜上的表达水平,相对表达量是对照组的0.73±0.11（P<0.05）,两者都具有显著的统计学意义。流式细胞术实验结果显示Rab5 WT和Rab5 CA可以明显增加Flag+/GFP+比值,而Rab5 DN明显减小Flag+/GFP+比值（P<0.05或0.01）,这表明Rab5 WT和Rab5 CA明显促进了BKCa通道蛋白向细胞膜上的转运。结论:Rab5能够明显增加表达在HEK293细胞上的BKCa电流及细胞膜上的表达,并可能促进了BKCa通道向细胞膜的转运过程。