【摘 要】
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【研究背景】川崎病（Kawasaki disease,KD）以好发于5岁以下的男性亚裔儿童为典型特征,并由于其严重的心血管受累及不可预测的后天性心脏病而得到临床的普遍重视。同时有学者认为血小板活化导致血管内皮下胶原暴露在KD不良冠脉预后中具有重要作用。临床上多采用阿司匹林用于KD抗血小板治疗,以预防患者不良冠脉预后的发生,然而由于阿司匹林抵抗（Aspirin resistance,AR）的存在,导
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【研究背景】川崎病（Kawasaki disease,KD）以好发于5岁以下的男性亚裔儿童为典型特征,并由于其严重的心血管受累及不可预测的后天性心脏病而得到临床的普遍重视。同时有学者认为血小板活化导致血管内皮下胶原暴露在KD不良冠脉预后中具有重要作用。临床上多采用阿司匹林用于KD抗血小板治疗,以预防患者不良冠脉预后的发生,然而由于阿司匹林抵抗（Aspirin resistance,AR）的存在,导致部分患者冠脉转归不良。可知血小板活化在KD发生发展中具有关键的作用。钙离子凝集素样受体2（Calcium lectin like receptor 2,CLEC-2）与其配体结合是目前已知的导致血小板活化聚集的新途径,该途径在促进血栓形成、协助肿瘤细胞转移、调节炎症反应、调节肺部发育、参与人早孕期母-胎界面的表达与调控等方面起重要作用。有研究发现CLEC-2可由活化血小板脱落或以膜包裹蛋白的形式分泌到血浆中;血浆CLEC-2水平在急性脑梗死患者中明显高于健康对照组,且与疾病不良预后密切相关。鉴于KD患者血小板高活化与疾病发生发展密切相关,但目前尚未见血浆或血浆外泌体中CLEC-2水平在KD中的报道,因此本研究拟分析血浆及血浆外泌体中CLEC-2水平在KD病程中的变化特征,分析其与KD患者冠状动脉损伤程度及是否发生阿司匹林抵抗的关系。新型血小板表面活化受体,CLEC-2在KD血小板活化中扮演着怎样的角色,需要我们来进一步明晰。另有研究表明,对于移民到全球其他地区的亚裔儿童,其仍有较高的KD患病率。提示KD发病与遗传因素相关。既往已有研究报道肿瘤坏死因子（TNF-α）及肿瘤坏死因子受体（TNFR）家族在KD的发病过程中也占据重要作用。因而在本研究中我们还选取了肿瘤坏死因子受体11A（Tumor necrosis factor receptor11A,TNFRSF11A）/rs7239667基因多态性来探讨其在KD易感及不良冠脉并发症之间的关系。【目的】本研究拟明确CLEC-2在KD病人中的表达及作用,明确TNFRSF11A基因多态性是否与KD易感性及冠脉损伤相关。【方法】选取于我院就诊的KD患者,依据患者所处病程时期、不同冠脉预后及是否发生阿司匹林抵抗将其分为不同的组别。其中151例KD病例的血浆采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行血浆CLEC-2水平的测定。取另外一组171例KD病例的血浆采用邻近编码技术（PBA）进行外泌体CLEC-2的测定。本研究拟从两个层面来明确血浆中CLEC-2在KD发病及冠脉不良预后中的变化特征。选取同时期于我院进行健康查体的儿童作为本研究的对照组,与病例组同时进行血浆及外泌体CLEC-2测定。此外选择1396例于我院就诊的KD患者和1673例健康对照组,提取全血基因组DNA、采取实时荧光定量PCR进行TNFRSF11A/rs7239667基因分型。【结果】1.血浆及外泌体CLEC-2的表达水平在KD患者的病程发展,阿司匹林抵抗,不良冠脉预后及血小板参数之间均不存在显著性差异（P＞0.05）。2.TNFRSF11A/rs7239667的G＞C多态性与KD易感性无关;3.TNFRSF11A/rs7239667的CC基因型可能是KD冠状动脉瘤（Coronary artery aneurysm,CAA）的保护因素（OR=0.69,95%CI=0.49-0.99,P=0.0429）,且对于60个月以内的KD患者更显著（OR=0.49,95%CI=0.49-0.93,P=0.0173）。【结论】1.暂未发现血浆及外泌体CLEC-2的水平与KD患者病程的发展,不良冠脉预后,阿司匹林抵抗及血小板参数（血小板计数,血小板平均体积,血小板分布宽度及大血小板比率）存在显著性关系。2.暂未发现TNFRSF11A/rs7239667G＞C基因多态性与KD易感性的关系,但该基因位点多态性是KD患者罹患CAA的保护因子,且主要针对60个月以内的患者起保护作用。
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