拟南芥氯离子通道蛋白CLC-c在生长和盐胁迫中的作用及其在油菜中超表达

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植物在生长发育过程中经常遇到盐害等不良环境因素的影响,并在长期的进化中逐步建立信号传导、生理生化以及形态发育的变化机制来适应环境。本研究首先筛选拟南芥基因表达谱数据库和发表文献中受盐胁迫显著诱导的相关基因,分离、鉴定其缺失突变体,分析这些突变体对盐胁迫反应的变化,从中获得编码氯离子通道蛋白CLC基因AtCLC-c。通过初步分析发现AtCLC-c的缺失突变体clcc耐盐性显著低于对照野生型,其根长仅为野生型的66%,且植株生长滞后,表明该基因产物在盐胁迫和生长中的正调控作用。为进一步分析该基因的超表达是否可促进植株的生长和耐盐能力,本研究还构建了AtCLC-c植物超表达载体,通过农杆菌介导的方法遗传转化拟南芥和甘蓝型油菜,分别获得超表达拟南芥和油菜的多个独立转化株系。初步观察发现拟南芥超表达植株在正常条件下的植株生长明显快于野生型,且具有较强的耐盐性。盐胁迫下的超表达种子萌芽率显著高于野生型,植株生长明显优于野生型,OE根长比野生型增加46%。进一步观察发现超表达AtCLC-c促进植株生长源自于其增强细胞的生长,在正常生长条件下,超表达植株的叶肉细胞大小比野生型增加了0.5-1倍。表明AtCLC-c在植株生长和耐盐方面具有显著的正调控作用,后续的研究将进一步分析超表达AtCLC-c对油菜的耐盐能力和生长发育的影响。此外,本研究还初步分析了另一个盐胁迫相关基因,编码核糖体蛋白L28(核糖体50s大亚基的组分)的基因AtCL28的功能的功能,并对拟南芥和油菜进行遗传转化,获得相关的转化植株,为后续研究提供材料。
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