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目的:代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）是2型糖尿病（T2DM）的常见并发症,其包括单纯脂肪肝、炎症、纤维化、肝硬化直至肝癌多个阶段。目前,T2DM合并MAFLD的病理机制尚未完全阐明,且缺乏有效治疗药物。NLRP3炎性小体激活与线粒体相关内质网膜（MAMs）稳态在T2DM与MAFLD的发展过程中发挥重要作用。本研究以NLRP3炎性小体激活及MAMs调控为关键点,探讨槲皮素对T2DM合并MAFLD的保护效应及作用机制。方法:动物实验:（1）SPF级雄性C57BL/6J小鼠分别喂食高脂饲料（HFD）和正常饲料16周后,HFD组小鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立T2DM合并MAFLD模型。随后将造模成功的小鼠分为T2DM合并MAFLD组（DM）和槲皮素干预组（DM+Qu）,同时正常饲料喂养的小鼠分为正常对照组（Con）和槲皮素对照组（Qu）。槲皮素以饲料添加的方式给予（1.5 g槲皮素/kg饲料,相当于100 mg/kg.bw）。所有小鼠继续喂养16周,超声剪切波弹性成像评价肝脏硬度。处死后迅速留取血清、肝脏样本。（2）检测血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平;油红O染色、苏木素-伊红染色（H＆E）和Masson染色观察肝脏脂质沉积、病理改变和胶原沉积;q RT-PCR测定肝组织炎性因子m RNA表达;western blot分析NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β及MFN2蛋白表达水平;免疫荧光共定位观察MFN2的表达与定位;透射电镜（TEM）与邻位连接技术（PLA）评价肝组织中MAMs数量。细胞实验:（1）正常糖（NG,5.5 m M葡萄糖）和高糖（HG,35 m M葡萄糖）培养的人来源肝细胞Hep G2,加入槲皮素或NLRP3炎性小体抑制剂MCC950处理。采用乳酸脱氢酶检测（LDH）和细胞计数（CCK8）评价细胞损伤及细胞活性,western5blot检测NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和MFN2蛋白表达水平。（2）MFN2小干扰RNA（MFN2 si RNA）处理Hep G2细胞。western blot检测MFN2干扰效率,荧光共定位及线粒体Ca2+探针评价MAMs水平。在此基础上,联合HG及槲皮素处理Hep G2细胞,测定LDH水平、细胞活力及NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β蛋白表达情况,分析MFN2干扰对MAMs数量和HG处理的肝细胞槲皮素保护效应的影响。结果:1.与对照组相比,T2DM-MAFLD小鼠血清转氨酶ALT和AST水平明显升高（P<0.001）。病理切片染色表明T2DM-MAFLD小鼠肝脏出现严重的脂质沉积、结构紊乱及纤维化,且弹性剪切波成像结果表明T2DM-MAFLD小鼠肝脏硬度显著增加（P<0.01）,T2DM-MAFLD小鼠模型成立。经槲皮素干预后,T2DM-MAFLD小鼠血清ALT和AST水平降低（P<0.001）,组织形态改善,肝脏硬度下降（P<0.05）。同时,HG处理的Hep G2细胞LDH释放增加（P<0.05）、细胞活力下降（P<0.05）;槲皮素处理有效减少细胞LDH释放,恢复细胞活力（P<0.05）。2.与对照组相比,T2DM-MAFLD小鼠肝脏炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α和TGF-β的m RNA表达水平显著升高（P<0.05）。并且,T2DM-MAFLD小鼠肝脏和HG处理的Hep G2细胞中NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β蛋白水平显著上升（P<0.05）。槲皮素有效逆转炎性基因及NLRP3相关蛋白的异常表达（P<0.05）。3.与对照组相比,T2DM-MAFLD小鼠肝脏MAMs结构受损,数量明显下降（P<0.001）。与动物结果一致,HG培养的Hep G2细胞MAMs呈减少趋势,同时,体内外结果均显示MAMs关键连接蛋白MFN2在高糖暴露条件下表达水平显著下降（P<0.05）。槲皮素处理有效逆转了高糖诱发的MAMs数量减少（P<0.05）和MFN2蛋白表达抑制（P<0.05）。Hep G2细胞经si MFN2转染后,MAMs数量减少,槲皮素对HG孵育Hep G2细胞MAMs数量的逆转作用被显著削弱,且槲皮素的细胞保护作用受限,显示为LDH释放增加与细胞活力下降（P<0.05）,NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β蛋白表达水平上升（P<0.05）。结论:T2DM代谢应激导致肝MAMs结构受损和数量下降,从而刺激NLRP3炎性小体活化,诱导MAFLD合并症的发生。槲皮素可能通过对MAMs-NLRP3通路的调控,有效缓解T2DM诱导的MAFLD病变。