PCR(聚合酶链反应)是体外快速扩增核酸的方法，它能使极微量的核酸在数小时之内扩增至原来的数百万倍以上。只要选择合适的引物，PCR就可特异性地大量扩增某一DNA片断至易检测水平。利用此原理，可以通过特异性地扩增某种微生物的基因片断而实现快速检测目的。 本试验旨在研究棒曲霉素产生菌Penicillium expansum的快速和特异的PCR检测方法及实时PCR条件参数的优化。 实验通过Penicillium expansum 3.3703的纯菌平板和液体培养以及纯菌接种于苹果、苹果果肉和苹果汁，用Cenis改良方法提取DNA，基于isoepoxydon dehydrogenase和Dolygatacturonase基因的两对引物扩增Penicillium expansum DNA的基础上，建立特异和快速的检测Penicillium expansum的方法；之后研究实时PCR扩增时退火温度、引物浓度以及模板浓度对扩增效果的影响，以获得最佳的参数。通过研究得到以下结论： (1)基于polygatacturonase基因的引物Ⅱ(POL)具有很强的特异性，只有目标DNA片段被扩增，而基于isoepoxydon dehydrogenase基因的引物Ⅰ(ISO)扩增特异性较差。纯培养可以检测到5xlO<-6>μgDNA/每反应体系，整个检测时间大约为5h，比传统的培养法时间(4～6d)大大缩短； (2)苹果、苹果果肉和果汁接种纯Penicillium expansum后所提DNA都得到了很好地扩增，具有很高的特异性，不受苹果样品DNA的干扰： (3)用lightercycler实时PCR扩增Penicillium expansum DNA的最佳退火温度大约为61℃，引物的最佳浓度约为0.20～0.4％mol/L，底物浓度对实时PCR扩增的影响较小。在以上参数下，可以获得良好的PCR扩增曲线、产物溶解曲线以及清晰的产物条带。 本研究建立的Penicillium expansum的PCR检测方法特异、快速、灵敏，可用于商品果汁和苹果汁工业化生产中Penicillium expansum的快速检测和质量控制，也可用于工艺过程对Penicillium expansum污染的快速溯源。 本研究获得的Penicillium expansum的实时PCR的较优参数，可作为其它微生物实时PCR检测时的方法学参考，也可用于苹果浓缩汁工业化生产中Penicillium expansum的快速检测和质量控制。