纳豆是传统发酵豆制品，由纳豆芽孢杆菌发酵蒸煮大豆制备而来。纳豆具有多种保健功能，如溶血栓、抗肿瘤、抗高血压，调节雌性激素，预防骨质疏松等。目前已发现纳豆中的活性成分主要有纳豆激酶、维生素K2、大豆异黄酮、γ-高聚谷氨酸等。尽管国内外已经对纳豆做了大量研究，然而对于纳豆中存在的一些糖复合物的研究报道较少。本研究以脱脂纳豆冻干粉为原料，优化纳豆糖肽（BNP）的提取工艺，采用现代分离纯化技术从BNP粗品中得到两种高纯度BNP组分，并对他们的结构以及体内外免疫活性进行探讨。主要研究内容及结果如下：1、采用响应面分析法（RSM）优化超声辅助提取BNP工艺。在单因素试验的基础上，考查液料比（mL/g）、NaCl浓度（mol/L）、超声时间（min）对BNP提取得率的影响。通过Box-Behnken试验设计和响应面分析确定超声辅助提取BNP的最佳工艺参数为：液料比24:1，NaCl浓度0.15mol/L，提取时间41min，在此条件下，BNP最高提取得率为1.89%。2、经DEAE-52阴离子交换柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析纯化，从纳豆糖肽中得到两种纯度较高的BNP： BNP-1-b和BNP-2-a。经高效凝胶渗透色谱（HPGPC）分析，其分子量分别为26.93和357.6kDa；通过红外扫描、紫外扫描、GC-MS和氨基酸自动分析仪进一步分析，结果显示，BNP-1-b中复合物以O-糖肽键相连，而BNP-2-a则以N-糖肽键相连； BNP-1-b和BNP-2-a都含有糖和蛋白的特征吸收峰；BNP-1-b主要由甘露糖、鼠李糖和阿拉伯糖组成，其摩尔百分比为67.45%，25.67%和2.44%；BNP-2-a主要由葡萄糖、甘露糖、木糖、半乳糖及少量的阿拉伯糖组成，其摩尔百分比为36.64%，21.71%，10.35%，9.00%和5.17%。氨基酸自动分析表明两种BNP均含有人体必需的各种氨基酸。3、经环磷酰胺（CTX）腹腔注射建立小鼠免疫功能低下模型。给药30d后，通过对小鼠脾脏、胸腺指数，血清溶血素水平，脾细胞转化能力，细胞因子分泌以及体外脾细胞增殖作用的测定，研究BNP对免疫功能低下小鼠免疫调节作用的影响。结果显示BNP中、高剂量给药组小鼠脾脏指数、HC50均显著高于模型组（P <0.05，P <0.01），高剂量组胸腺指数显著高于模型组（P <0.05）；低、中、高剂量组ConA诱导的脾细胞增殖活性均显著高于模型组（P <0.05，P <0.01）；中、高剂量组IL-2水平、高剂量组IFN-γ水平显著高于模型组（均P <0.05），而IL-10水平显著低于模型组（P <0.05，P <0.01）；100~200μg/mL BNP-1-b和12.5~200μg/mL BNP-2-a可显著增强体外脾淋巴细胞增殖活性（P <0.05，P <0.01），50μg/mL BNP-1-b和50~200μg/mL BNP-2-a对ConA诱导的体外脾淋巴细胞增殖活性也具有显著增强作用（P <0.05，P <0.01）。