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目的肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)(以下简称肝癌)是原发性肝癌中最为常见的类型。肝癌组织中常伴有多种代谢功能异常,目前已有研究发现肝组织中存在细胞色素B5B(CYB5B)的表达,CYB5B是一种含有一个血红素辅基的小分子蛋白质,其在组织内通过电子转移参与氧化反应等生化转化。本研究旨在探讨CYB5B在肝癌组织中的表达及对患者预后的评估价值。方法收集2013～2016年期间在上海东方肝胆医院和北部战区总医院行肝癌切除术的122例患者的一般临床资料和肝癌组织及癌旁组织标本,并进行定期随访。采用荧光实时定量PCR实验(Real-time PCR)、蛋白印迹法(Western blot)和免疫组织化学染色(IHC)实验分别检测肝癌组织及癌旁组织中CYB5B m RNA及蛋白质的表达水平。通过χ~2检验及t检验分析CYB5B表达水平与肝癌病理特征相关指标的关系以及与一般临床资料的关系。并通过Kaplan-Meier、COX风险比例回归模型分析CYB5B的表达水平、肝癌病理特征相关指标及一般临床资料与患者预后的关系。结果1、肝癌组织和配对癌旁组织标本检测结果(1)荧光实时定量PCR实验(Real-time PCR)检测CYB5B的m RNA表达结果,CYB5B的m RNA在肝癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织。(2)蛋白印迹法(Western blot)检测CYB5B的蛋白表达结果,CYB5B的蛋白在肝癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织。(3)免疫组化方法(IHC)检测肝癌组织和癌旁组织标本中CYB5B的染色结果,CYB5B蛋白主要定位在胞浆中,肝癌组织中CYB5B呈深染色,癌旁组织中CYB5B呈弱染色。2、CYB5B表达水平与肝癌病理特征及临床资料的相关性结果(1)CYB5B的表达水平与微血管侵犯(P<0.001)、门静脉癌栓(PVTT)(P=0.008)呈正相关,与肿瘤包膜有无(P=0.032)呈负相关;而与肿瘤大小(P=0.146)、肿瘤子灶(P=0.516)无相关性。(2)CYB5B的表达水平与肿瘤TNM分期(P=0.013)、BCLC分期(P=0.001)呈正相关。(3)CYB5B的表达水平与一般临床资料,包括年龄(P=0.224)、性别(P=0.220)、甲胎蛋白(AFP)(P=0.379)、总胆红素(TBIL)(P=0.920)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)(P=0.065)、碱性磷酸酶(ALP)(P=0.905)无相关性。3、通过Kaplan-Meier、COX风险比例回归模型分析患者预后的结果(1)CYB5B的表达水平与肝癌患者的预后密切相关,CYB5B表达水平与患者总生存时间(OS)和肿瘤复发时间(TTR)呈明显负相关(P<0.05)。(2)单因素分析显示CYB5B高表达、肿瘤大小(>5cm)、甲胎蛋白(AFP)(>400 ng/ml)、TNM分期不良、BCLC分期进展、微血管侵犯及门静脉癌栓(PVTT)与肝癌患者总生存时间(OS)和复发时间(TTR)均显著相关。(3)多因素分析结果表明CYB5B高表达和肿瘤大小(>5cm)是肝癌患者不良预后的危险因素。结论1、CYB5B在肝癌组织中m RNA和蛋白异常高表达。2、CYB5B的高表达与肝癌相关的临床病理特征指标中肿瘤TNM分期、BCLC分期、微血管侵犯、门静脉癌栓(PVTT)和肿瘤包膜显著相关。3、CYB5B的高表达与患者总生存时间(OS)和肿瘤复发时间(TTR)呈负相关,高表达的CYB5B提示肝癌不良临床预后,可作为肝癌患者预后的指标。