【摘 要】
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目的:由于AZD2014是TOR蛋白激酶的抑制剂,因此通过观察不同浓度AZD2014在体外培养的细粒棘球蚴原头蚴的活性,从而得到AZD2014作用于原头蚴的相对最适浓度,进一步验证了原头蚴
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目的:由于AZD2014是TOR蛋白激酶的抑制剂,因此通过观察不同浓度AZD2014在体外培养的细粒棘球蚴原头蚴的活性,从而得到AZD2014作用于原头蚴的相对最适浓度,进一步验证了原头蚴体内存在TOR蛋白激酶;并通过阻断原头蚴体内的TOR蛋白激酶活性,从而阻断PI3K-AKT-TOR细胞信号通路,进而杀灭囊泡内的原头蚴,为靶向药物治疗包虫病提供理论和研究基础。方法:1.不同浓度的AZD2014在体外培养细粒棘球蚴原头蚴,通过0.1%的伊-红染色后观察原头蚴的存活率,并连续观察15天同时统计其存活率;2.不同浓度AZD2014体外培养原头蚴4天后,取其蛋白上清液,用Western-blot验证TOR下游蛋白因子的表达情况,用ELISI试剂盒检测Caspase-3酶活性的表达;3、用100μM的AZD2014培养原头蚴1天,4天,7天后,取其蛋白上清液,用Western-blot验证TOR下游蛋白因子的表达情况,用ELISI试剂盒检测Caspase-3酶活性的表达。结果:1、随AZD2014培养浓度的增大而原头蚴的存活率逐渐下降,随AZD2014培养时间的延长而原头蚴的存活率逐渐下降;2、Western-blot验证TOR蛋白下游蛋白因子p-AKT,p-S6K1,p-4EBP1的表达量随AZD2014浓度的增大而下降,且随AZD2014培养时间的延长而下降(P﹤0.05);3、ELISI验证Caspase-3的活性随AZD2014培养浓度的增大而升高,且随AZD2014培养时间的延长而升高(P﹤0.05)。结论:1、AZD2014通过抑制原头蚴体内的TOR蛋白而具有杀灭原头蚴的作用;2、AZD2014杀灭体外培养的细粒棘球蚴原头蚴具有时间和浓度的依赖性。
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