α-Klotho蛋白在丙泊酚诱发大鼠认知功能障碍中的作用

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:XIEJUANJUAN1984
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目的:探究α-Klotho对丙泊酚致认知功能障碍大鼠的治疗作用及机制,为α-Klotho应用于临床提供理论依据。方法:28周龄SD雄性大鼠50只随机分为5组(n=10):对照组(Con组),丙泊酚组(Pro组),丙泊酚+α-Klotho注射组(Pro+Kl组),脂肪乳剂组(Lip组),脂肪乳剂+α-Klotho组(Lip+Kl组)。首先行为期5d的水迷宫实验,24h后行药物实验:Con组不进行药物实验;Pro和Pro+Kl组大鼠经尾静脉持续泵注丙泊酚注射液(100 mg/kg/h)3 h,Lip和Lip+Kl组经尾静脉持续泵注相同剂量脂肪乳剂3 h。泵注结束后Pro+Kl和Lip+Kl组大鼠腹腔注射α-Klotho(0.01mg/kg),Pro和Lip组腹腔注射等量生理盐水。24 h后再次行水迷宫实验(MWM)测评大鼠认知功能,结束后每组随机取5只大鼠海马组织切片行苏木精-伊红(HE)染色分析大鼠海马形态学变化;免疫组织化学染色(IHC)法分析海马神经元NLRP3蛋白表达的情况;WB法分析海马组织内α-Klotho的表达量以及NLRP3、ACS、Caspase-1及IL-1β、IL-18的表达水平。运用ELISA法检测氧化损伤指标SOD、MDA的含量。结果:经丙泊酚注射后Pro、Pro+Kl组MWM结果显示大鼠出现认知障碍,且其海马组织神经元细胞具有鲜明的结构改变,细胞排列较疏散且不规则。此外,Pro、Pro+Kl组大鼠海马组织中α-Klotho表达降低,NLRP3信号通路相关蛋白(NLRP3、ACS、Caspase-1、IL-1β、IL-18)表达显著增加,并且海马区氧化应激程度明显提高。但经外源性补充α-Klotho后可逆转丙泊酚致大鼠认知功能障碍程度,Pro+Kl组大鼠海马神经元改变趋于Con组,并且NLRP3信号通路炎症因子表达较Pro组有降低趋势,且氧化应激反应有所降低。Lip组及Lip+Kl组大鼠海马神经元细胞无明显异常,与Con组较为接近。结论:1.外源性补充α-Klotho可显著改善丙泊酚麻醉导致大鼠的认知功能障碍,其机制与抑制海马神经中枢NLRP3炎症信号通路与减少氧化应激损伤相关。2.α-Klotho对未来围手术期认知功能障碍的治疗具有潜在应用价值。
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