【摘 要】
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目的：采用自主制备的烟气提取物(cigarettesmokeextract,CSE)研究其细胞毒性,并探讨黄芩苷对香烟烟气提取物引起的人肺泡上皮细胞损伤的作用,为下一步开发添加植物提取物的减
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目的：采用自主制备的烟气提取物(cigarettesmokeextract,CSE)研究其细胞毒性,并探讨黄芩苷对香烟烟气提取物引起的人肺泡上皮细胞损伤的作用,为下一步开发添加植物提取物的减毒药烟提供一定实验依据。
材料与方法：培养人肺泡上皮细胞A549,自主制备香烟烟气提取物(CSE),确定相关的实验条件,用黄芩苷预处理细胞后,再用CSE刺激细胞,用MTT实验检测细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡率,彗星实验观察DNA损伤,荧光法测定细胞内活性氧(ROS)含量以观测黄芩苷对烟气的细胞毒保护作用。
结果：1、确定实验条件:1％浓度的DMSO在实验时间内(12h,24h,36h)肺泡上皮细胞的存活率与对照组相比没有差异;试验用黄芩苷浓度(5mg/L,10mg/L,20mg/L,40mg/L)在24h内肺泡上皮细胞的存活率与对照组相比较没有统计学差异;随着CSE浓度的增加和作用时间的延长,细胞存活率下降,各组之间有统计学意义(P＜0.05),短时间实验条件下,50％CSE细胞存活率能满足实验要求。2、50％CSE刺激细胞可以起细胞存活率下降、细胞内活性氧含量升高、细胞凋亡率及DNA损伤增加;用黄芩苷预处理后这种损伤作用明显降低,与阳性对照组之间差异有显著性(P＜0.05)。
结论：1、本研究采用的提取物制备条件及细胞染毒条件适用于香烟烟气的细胞毒性研究。2、黄芩苷可以拮抗香烟烟气提取物引起的细胞损伤,提高细胞的存活率,降低凋亡率,其原因可能与黄芩苷能降低细胞内活性氧(ROS)含量,减少DNA损伤有关。
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