径向流色谱法纯化食用菌粗多糖及动力学研究

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径向流色谱是一种新型色谱分离纯化技术,采用独特的径向流动设计,与传统轴向色谱相比,具有流速高、样品处理量大、操作压力低、线性放大容易等突出优势,在生物工程产品中的应用逐步受到重视。本论文旨在利用径向流色谱对食用菌粗多糖进行纯化,优化试验操作条件。主要研究内容及结果如下:1.通过单因素试验得:径向流色谱法纯化灵芝粗多糖的最佳分离介质为离子交换剂A103S;随着上样浓度、上样流速、洗脱流速及上样量的增加,蛋白脱除率和色素脱除率呈不同程度下降;离子交换剂A103S经再生后重复使用对多糖纯化效果影响较小。2.通过响应面分析建立了径向流色谱纯化灵芝粗多糖的数学模型,并确定了较好的纯化工艺参数:上样流速2 mL/min,洗脱流速40 mL/min,上样量100 mL。在此条件下,蛋白脱除率为80.35%,色素脱除率88.52%,多糖回收率85.06%。3.径向流色谱法与各种化学方法对灵芝粗多糖脱蛋白脱色效果的比较表明,径向流色谱脱蛋白、脱色及多糖保留效果都优于其它方法,且适用于不同种类食用菌粗多糖的分离纯化过程。在灵芝粗多糖纯化实验中,径向流色谱以较小的路径(3.15 cm)取得与轴向色谱(46.00 cm)同样的效果。4.利用脉冲示踪法测定了径向流色谱内流体的停留时间分布,得不同洗脱流速下的停留时间分布曲线,停留时间随洗脱流速的增大显著降低。5.运用质量守恒定律,导出了径向流色谱动力学方程。模型求解所得不同体积流速下的洗脱曲线与实验所得不同体积流速下的停留时间分布曲线,在峰型及曲线变化趋势上基本一致,所建模型可靠,为径向流色谱纯化食用菌多糖提供了理论依据。
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