诺卡氏菌属（Nocardia spp.）能够引起人类和动物皮肤、肺部和中枢神经性疾病。鼻疽诺卡氏菌是临床上最常被分离到的菌种之一。目前,对诺卡氏菌的免疫机制和致病机制还知之甚少。因此,本研究利用免疫蛋白质组学方法分离鼻疽诺卡氏菌IFM 10152菌体蛋白和分泌蛋白,与免疫血清反应,鉴定其中的蛋白质抗原。为研究诺卡氏菌的致病机制、发展早期诊断分子靶标和候选疫苗奠定基础。首先,利用双向电泳分别分离鼻疽诺卡氏菌IFM 10152菌体蛋白和分泌蛋白。并行进行两块胶的双向电泳,一块胶进行考马斯亮蓝染色,另一块胶上的蛋白点转移至固相,与免疫血清进行免疫杂交。对19个免疫反应阳性点进行胶内酶切,随后使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对这些蛋白进行鉴定,成功鉴定出13个蛋白。本研究选取了分泌蛋白中的5个蛋白（NFA45140、NFA555680、NFA48660、NFA49580和NFA15900）进行克隆表达和纯化,并使用免疫杂交方法验证其抗原性。为了进一步研究这五个蛋白的免疫特性,将其分别免疫小鼠,用间接ELISA法检测血清中IgG、IgG1和IgG2a抗体水平。结果发现五个重组蛋白均能诱导高水平的特异性抗体,特别是指示Th2型免疫应答的IgG1显著增高。同时,检测相应重组蛋白刺激后的小鼠脾细胞上清中的IFN-γ、IL-2和IL-4,三个细胞因子水平均增高。结果表明,五个重组蛋白可以在宿主体内引起体液免疫和细胞免疫应答。为了进一步研究这些抗原的功能,利用生物信息学方法分析和预测了五个蛋白的抗原表位、氨基酸同源性、功能及毒力。发现NFA48660、NFA49580和NFA15900具有较高的保守性和特异性,可以作为候选临床诊断分子靶标。NFA55680、NFA49580和NFA15900可能是潜在的毒力因子和保护性抗原,具有毒力和免疫保护作用。综上所述,本研究共发现了鼻疽诺卡氏菌13个新的免疫原性蛋白,同时评估了其中5个蛋白的免疫原性价值。这些蛋白可能为诺卡氏菌的致病机理揭示潜在的毒力因子,同时也为诺卡氏菌诊断试剂和保护性疫苗的研发提供了新的候选分子。