葡萄果实糖、酸含量性状QTL定位及候选基因分析

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:wwh447
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葡萄果实中可溶性糖和有机酸的含量影响葡萄的风味和品质,糖酸含量是由多基因控制的数量性状,并且受外部环境因素影响较大。我国是葡萄生产大国,研究葡萄果实中糖、酸含量性状的遗传及调控机制,对培育优质葡萄新品种具有重要意义。本研究利用高效液相色谱技术对三个葡萄杂交群体成熟果实中的可溶性糖和有机酸的含量进行测定,结合已经构建的葡萄高密度分子遗传图谱,对果实的可溶性糖和有机酸性状进行了QTL定位研究,筛选出可能与葡萄果实中糖酸含量积累有关的候选基因,并用q RT-PCR对候选基因的功能进行分析验证。主要结论下:1.分析了‘着色香’ב红地球’,‘红地球’ב金星无核’,‘红地球’ב双优’杂交后代群体中糖酸物质含量分布特点,在三个组合后代中果糖,葡萄糖,草酸,酒石酸,苹果酸和柠檬酸含量范围广泛。葡萄果实中的可溶性糖主要是果糖和葡萄糖,果糖含量变化范围在41.22~119.00 mg?g-1FW之间,葡萄糖含量变化范围为45.05~178.11mg?g-1FW。有机酸主要是苹果酸和酒石酸,酒石酸含量变化范围在0.73~8.65 mg?g-1FW之间,苹果酸含量变化范围为0.17~8.11 mg?g-1FW。且各物质组合传递力都高于75%,均能在亲本和子代中稳定遗传。三个杂交组合中都有超亲单株存在,不同组合超高亲率不同。2.基于三个不同的葡萄整合遗传图谱,结合葡萄杂交后代果实糖酸含量数据,使用Map QTL6.0和R/qtl软件,进行葡萄果实糖酸性状QTL定位。在‘红地球’ב双优’群体中,在LG1上定位到与果糖有关的QTL位点;在LG6上定位到与葡萄糖有关的QTL位点;在LG11上同时控制苹果酸和总酸的QTL;在LG13上定位到同时控制葡萄糖和总糖的QTL;在LG14上定位到同时控制果糖,葡萄糖,总糖的QTL;在LG17上定位到与总糖,草酸,苹果酸有关的QTL位点。‘红地球’ב金星无核’群体中,在LG18上定位到同时控制草酸、苹果酸、总酸的QTL位点。‘着色香’ב红地球’群体中,在LG5上定位到同时控制果糖和总糖的QTL位点;在6号连锁群上检测到同时控制苹果酸和柠檬酸的QTL位点;在13号连锁群上定位到同时控制总酸和苹果酸以及同时控制柠檬酸和总酸的QTL位点。3.根据糖酸性状QTL定位结果,结合葡萄参考基因组和NCBI上的基因功能注释信息,筛选出VIT_213s0019g05250,VIT_211s0016g03400,VIT_211s0118g00200与VIT_201s0011g00240四个可能与糖酸含量积累相关的候选基因。利用实时荧光定量技术,分析候选基因在‘着色香’、‘红地球’、‘双优’以及‘金星无核’四个品种的q RT-PCR结果,结合果实不同发育阶段具体糖酸含量的变化,对比分析果实不同发育阶段各个基因的相对表达量。推测VIT_211s0016g03400,VIT_211s0118g00200与VIT_201s0011g00240基因可能参与果实中可溶性糖的积累;VIT_213s0019g05250基因可能影响苹果酸含量,参与苹果酸代谢过程。
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