纳微颗粒在膜表面吸附行为及其相互作用研究

来源 :天津大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangaijjuan860610
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环境中存在的各种纳微颗粒(如微米级大气颗粒物、纳米级合成颗粒)如何影响人类健康备受关注。本论文选取飞灰颗粒物和金纳米棒(GNRs)作为纳微颗粒的典型代表,采用耗散型石英晶体微天平(QCM-D)与其它光谱学技术研究其在蛋白或模型细胞膜表面的吸附行为及其相互作用规律,主要研究内容如下:(1)飞灰颗粒物成分分析及其在蛋白溶液中的行为:飞灰颗粒物会造成雾霾和健康危害,研究飞灰颗粒物在蛋白溶液中的分散沉降行为,分析其与健康危害之间的联系。选用粘蛋白(BSM、PGM)和牛血清白蛋白(BSA)作为模型蛋白。飞灰颗粒物来源于城市生活垃圾焚烧厂,平均粒径为9.35±0.97μm,所含重金属Fe、Zn、Pb含量高于人体健康风险水平。沉降速度:超纯水>粘蛋白溶液>BSA溶液,且在蛋白溶液中小粒径颗粒比例明显增加,说明粘蛋白和BSA能促进飞灰颗粒物在溶液中分散,可能随之迁移至身体其它部位,造成健康危害。(2)飞灰颗粒物与蛋白相互作用规律及其在膜表面的吸附行为:相互作用及吸附行为研究揭示飞灰颗粒物的毒性和健康危害,提供健康风险预警。组合运用多种光谱学技术考察飞灰颗粒物与3种蛋白溶液相互作用规律,结果表明飞灰颗粒物的加入,引起粘蛋白及BSA结构疏松,蛋白α螺旋的含量逐渐降低,蛋白荧光发生淬灭,这些结果表明飞灰颗粒物与粘蛋白和BSA发生了相互作用。其中,飞灰颗粒物与BSM及BSA的结合常数分别为5.35 L/g和4.18 L/g。QCM-D实时监测吸附行为结果表明:随着飞灰颗粒物的引入,粘蛋白膜表面的质量减少,而BSA膜表面的质量略微增加,说明飞灰颗粒物会破坏粘蛋白膜。(3)金纳米棒在模型细胞膜表面的实时吸附行为:GNRs在治疗和诊断方面具有广阔的应用前景。GNRs与模型细胞膜的相互作用研究,为二者相互作用提供较为全面系统的理解,并在一定程度上指导运用。在QCM-D芯片表面构建DOPC支撑脂质双分子层,作为模型细胞膜。QCM-D结果表明:随着GNRs浓度增加,模型细胞膜表面吸附质量逐渐增加;Zeta电位相近的情况下,小尺寸的GNRs吸附质量更高;在中性p H下,GNRs在表面的吸附质量和速率随着Na+浓度的增加(10–1000 m M)和Ca2+浓度的增加(0.1–0.5 m M)而增加,但当Ca2+浓度继续增加(0.5–10 m M),吸附质量和速率均降低。另外,由于静电相互作用的变化,p H也影响GNRs的吸附行为。基于实验结果,推断了可能的吸附机理:在高浓度Na+下,水合斥力有所减弱,使更多GNRs发生吸附;而高浓度Ca2+下,GNRs发生聚集,且模型细胞膜表面电荷发生反转,与GNRs产生静电排斥,使得表面吸附量降低。
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