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目的:多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种恶性浆细胞疾病,目前仍不可治愈。免疫治疗因其靶向性及低毒性在MM的治疗领域得到了越来越多的关注和研究。来那度胺(Lenalidomide)是广泛应用的免疫调节剂。埃罗妥珠单抗(Elotuzumab,Elo)是继CD38单克隆抗体Daratumumab之后,第二个被批准用于治疗MM的单克隆抗体药物,与来那度胺和地塞米松联合(E-Rd方案)治疗复发/难治性MM。埃罗妥珠单抗靶点为信号淋巴细胞激活分子家族成员7(SLAMF7,也称为CS1)。虽然E-Rd方案获得很好的疗效,但仍有部分患者出现耐药。单克隆抗体类药物耐药是目前免疫治疗的研究热点。关于埃罗妥珠单抗耐药的相关研究少见。本研究拟通过体内及体外研究,探索免疫治疗耐药发生的机制,寻求新的免疫治疗靶点及逆转耐药。研究方法:1、模拟人体耐药发生过程,应用小剂量药物诱导的方法构建埃罗妥珠单耐药(U266/EloR,UE)及来那度胺与埃罗妥珠双耐药(U266/R10R/EloR,URE)的骨髓瘤耐药细胞系;2、基因表达谱芯片检测U266野生型(UW)和已经构建的U266来那度胺单耐药(UR)细胞,及本研究构建的UE,URE四种细胞mRNA基因谱表达;3、RT-qPCR进一步验证基因芯片结果,并检测初治MM(NDMM)及复发难治MM(RRMM)患者CCL20基因的mRNA的表达;4、在已发表骨髓瘤数据库中,应用生物信息学分析NDMM及RRMM患者CCL20的表达;5、应用ELISA方法检测MM患者血浆中CCL20的含量;6、增加CCL20,应用CCK-8法检测耐药细胞对来那度胺和埃罗妥珠单抗的药物敏感性;7、构建UR小鼠皮下移植瘤模型,检测CCL20联合来那度胺治疗对小鼠肿瘤生长的作用。结果:1、成功构建了埃罗妥珠单耐药及来那度胺与埃罗妥珠双耐药骨髓瘤细胞系。2、CCL20基因在耐药UR,UE,URE细胞中表达下降;与NDMM相比,RRMM患者的CCL20基因表达下调;对已有骨髓瘤数据库进行生信分析,结果也显示RRMM患者CCL20基因表达下调。3、与NDMM相比,RRMM患者血浆中CCL20蛋白含量下降。4、CCL20增加耐药UR,UE,URE对免疫调节药物的敏感性。5、进一步的体内研究显示,CCL20能够增加耐药骨髓瘤小鼠对来那度胺的药物敏感性。结论:趋化因子CCL20基因在来那度胺与埃罗妥珠单抗耐药骨髓瘤细胞株及复发难治多发性骨髓瘤患者中表达下降;复发难治骨髓瘤患者血浆中CCL20含量下降;恢复CCL20水平可增加耐药细胞系与耐药小鼠对免疫调节药物来那度胺的药物敏感性。