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本文对梨的组织培养技术进行了较为系统的研究。分别以13个杂交或自交梨组合的胚、翠冠梨的茎段、新高梨自交组培苗叶片为材料,实验研究了其相应的离体再生方式、培养条件及其关键影响因子,为梨优良种质的获得及其良种快速繁殖提供了科学依据和技术基础。主要结果如下: 1、胚培养。以13个砂梨和白梨系统的杂交和自交组合为研究对象,研究了幼胚组织培养技术,并成功地获得了再生植株。结果表明,以培养基1/2MS+6-BA0.5mg/L适于幼胚再生,但不同结合之间、尤其是杂交与自交组合之间,幼胚的离体再生能力和表现有很大差异,在该培养基配比条件下,砂梨与砂梨杂交的组合,无论哪种梨品种为父本,幼胚出芽率和生根率都较其他组合好。外植体对胚培养有影响,带部分子叶的胚比不带子叶或带完整子叶的胚更适于该培养条件。 2、茎段培养。在激素水平为6-BA2.0mg/L和IBA0.2mg/L的条件下,选取1/2MS为基本培养基可以获得高于以WPM或AS为基本培养基的外植体再生率。有芽茎段和无芽茎段具有不同的再生方式及不同的适宜条件。有芽茎段倾向于不经过脱分化而直接出芽,可以省略诱导愈伤阶段;而无芽茎段培养则必须经过脱分化阶段,先诱导出愈伤组织,然后诱导不定芽。就本研究所选用的3种基本培养基而言,AS较适合无芽茎段的愈伤组织诱导,愈伤组织生长良好。 3、叶片培养。经过正交实验筛选出最佳培养基配比为NN69+0.5 mg/LTDZ+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA。接种方式以叶基部向上的叶片愈伤率和出芽率都是最高的。叶龄对叶片培养有较大影响,以胚培养再生后继代培养1 5-30d的叶片进行叶培养,无论是愈伤率还是出芽率,都明显优于继代培养30d以上的叶片。 4、移栽。移栽基质和移栽方式对组培苗移栽成活率无明显影响,不管在哪种基质用哪种方式盘炼,只要无菌苗出瓶时生长健壮均能获得较高的移栽成活率,这说明组织培养外植体成功与否主要在于无菌培养阶段,移栽基质和移栽方式只影响其适应外界条件的时间长短。