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背景黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是黄曲霉和寄生曲霉产生的真菌毒素,继发于其饮食摄入的人类健康问题引起了广泛重视。目前国内外关于AFB1诱发组织损伤的研究多局限于肝脏,而关于其诱导心肌毒性机制的研究相对较少。有研究指出,AFB1诱导的心肌损伤与炎症反应有关。炎症的发生通常需要传感器,如NLRP3(NOD-like receptor protein 3)炎症小体,小体的过度激活是多种疾病的发生的核心事件。而且,作为AFB1的主要损伤靶标,NLRP3炎性小体参与了其诱导的肝脏损伤过程。目的本研究通过检测在AFB1诱导的大鼠心肌损伤模型中NLRP3及其他炎性小体相关蛋白的表达情况,及MCC950(选择性NLRP3炎性小体抑制剂)对心肌损伤程度的影响,初步探讨NLRP3炎性小体在AFB1诱导大鼠心肌损伤中的作用。方法第一部分:将大鼠随机分为对照组、低暴露AFB1组和高暴露AFB1组,每组5只。对照组大鼠不加AFB1,低剂量和高剂量组大鼠分别用AFB1溶液量0.15mg/kg、0.3 mg/kg灌胃,每日一次,连续6周。首先通过苏木素-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察心脏组织的形态学改变,Western blot及酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测NLRP3炎性小体相关蛋白的表达情况。第二部分:设三个组:对照组、AFB1组和AFB1+MCC950组,每组5只大鼠。通过每日AFB1溶液(0.3 mg/kg.d)灌胃一次连续6周的方法,制备大鼠心肌损伤模型,同时AFB1+MCC950组大鼠还要接受腹腔注射MCC950溶液(MCC950是NLRP3炎性小体特异性抑制剂),每次注射量10mg/kg,每周三次。6周后,腹主动脉取血,比较3组大鼠血清中乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH),肌酸激酶-MB(Creatine Kinase-MB,CK-MB)的水平。结果1.心肌病理学评分:不同浓度的AFB1暴露后可观察到不同程度的组织形态学改变,其病理学评分与剂量成正相关。但仅当AFB1的浓度增加至0.3 mg/kg时的组织病理学计分与对照组相比存在统计学差异(P<0.05)。2.NLRP3炎性小体相关蛋白表达的分子学改变:不同AFB1处理剂量的NLRP3炎性小体相关蛋白表达不同。高剂量组同对照组NLRP3、ASC表达明显不同(P<0.01),而低剂量组NLRP3、ASC表达较对照组及高剂量组均未见明显统计学差异(P>0.05);同对照组比较,不同浓度的AFB1干预后caspase-1p20、IL-1β表达存在统计学差异(P<0.05)。3.血清心肌损伤标志物LDH和CK-MB的含量:AFB1组大鼠血清LDH和CK-MB的值高于对照组;而AFB1+MCC950组大鼠的血清LDH和CK-MB水平低于AFB1组。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论1.AFB1导致大鼠心肌损伤,NLRP3炎性小体相关蛋白表达增强,且随着AFB1剂量的增加,心肌NLRP3炎性小体相关蛋白表达越高,呈一定的剂量效应趋势。2.使用NLRP3抑制剂可有效改善AFB1诱导的大鼠心肌损伤。