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干扰素调节因子(Interferon regulatory factors,IRFs)是一种转录因子,能够调控干扰素(interferon,IFN)基因和干扰素刺激基因(IFN-stimulated genes,ISGs)的功能。IRFs还能够结合启动子上游特殊的DNA序列,从而对目的基因表达的蛋白产生激活或者抑制的影响。IRFs作为重要的转录因子,在IFN的转录调控、病原体的免疫反应、先天性免疫应答和细胞的分化、生长及凋亡等方面均起着至关重要的作用。迄今为止,已经鉴定出11个IRFs:IRF1~IRF11,其中IRF4分为IRF4a和IRF4b两种亚型。IRFs共分为IRF1、IRF3、IRF4和IRF5四个亚家族。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)不仅是固有免疫系统识别病原相关分子模式的主要受体,并且由其启动的信号通路还能调控适应性免疫应答。TLRs信号通路主要分为两种:MyD88依赖的信号通路和非MyD88依赖的信号通路。由此可见,髓样分化因子(meyoid differentiation factor 88,MyD88)是TLRs信号通路中重要的接头分子,在传递上游信息和疾病的发生发展中具有重要的作用。MyD88可能对干扰素调节因子(IRFs)有影响,但IRFs对MyD88的调控机制尚不完全清楚。随着海水养殖规模的逐年扩大,养殖种类和产量也是与日俱增。在水产养殖走向高速发展的同时,一系列的问题也随之出现。其中,危害最大的就是鱼类病害的频繁出现。只有提高养殖鱼类抵御病害侵袭的能力,选育出抗病优良品种才能确保水产养殖业的可持续发展。鮸鱼(Miichthys miiuy)是我国重要的海洋经济鱼类。为找出鮸鱼的免疫分子,对其免疫相关分子的研究颇为重要。在本研究中,我们证明了鮸鱼IRF1亚家族家族成员IRF1作为一种负调控因子,能通过促进MyD88的降解从而对MyD88介导的NF-κB报告基因的荧光活性产生抑制作用。本文主要研究了鮸鱼的IRF1基因的调控功能,主要结论如下:(1)通过双荧光素酶报告基因实验,证实鮸鱼IRF1对MyD88介导的报告基因的荧光活性有抑制作用,并且在敲降IRF1后能够缓解这种抑制作用。(2)过表达IRF1和敲降IRF1的western blotting实验中,确定了鮸鱼的IRF1对MyD88有调控作用——IRF1能够抑制MyD88基因的表达或者是IRF1能够促进MyD88蛋白的降解。(3)通过对蛋白降解途径的分析,明确了IRF1能够促进MyD88蛋白的降解,并且该蛋白降解途径为泛素-蛋白酶体途径。(4)通过western blotting实验和双荧光素酶报告基因实验,IRF1的DBD结构域是其主要的功能结构域,IRF1功能的产生与该结构有着密不可分的联系。