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目的观察Bax-抑制肽(Bax-inhibiting peptide, BIP)(?)寸缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemic brain damage, HIBD)新生大鼠海马神经细胞的细胞色素C(cytochrome C, Cyt C)及促凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)的影响,以探讨Bax抑制肽对HIBD后的神经保护作用,为临床治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤提供理论依据。方法182只7日龄Wistar大鼠,随机分为假手术组(n=14只)、对照组(n=84只)、干预组(n=84只)。对照组与干预组通过结扎新生大鼠左侧颈总动脉和8%低氧处理2h制备新生大鼠HIBD模型,假手术组仅游离左侧颈总动脉,不予结扎及低氧处理。干预组于HI即刻、6h、12h、24h、48h、72h左侧侧脑室内注射5ugBIP(即5u1),对照组于相同时间点予等量生理盐水(5ul)左侧侧脑室内注射,按注射时间点不同分别分为6个不同亚组。所有实验动物均于术后7d处死。应用HE染色、末端脱氧核甘酸转移酶(TdT)介导的生物素化-dUTP原位缺口末端标记法(TUNEL)及蛋白免疫印迹法(Western Blot)观察各组病理变化、细胞凋亡及Cyt C、Caspase-3蛋白释放情况。结果(1)海马区TUNEL P日性细胞数目变化：对照组及干预组HIBD后左侧大脑海马区TUNEL P日性细胞表达较假手术组显著增加,差异有极显著性意义(P<0.01)。干预组与对照组在0h、6h、12h、24h、48h亚组比较,凋亡细胞数目明显减少(P<0.01),干预组0h亚组凋亡细胞数较干预组6h、12h、24h、48h亚组减少(P<0.05)；(2)活性caspase-3及Cyt C的含量变化：对照组及干预组caspase-3活性片段、Cyt C释放量较假手术组显著增加,差异有极显著性意义(p<0.01)。干预组与对照组在0h、6h、12h、24h、48h亚组比较,caspase-3活性片段、Cyt C释放量显著减少(P<0.01),干预组0h亚组caspase-3活性片段、Cyt C释放量较干预组6h、12h、24h、48h亚组减少(P<0.05)。结论Bax-抑制肽治疗能显著降低HIBD新生大鼠海马神经细胞凋亡发生率,HI后48小时内为BIP最佳治疗时间窗,治疗时间越早作用越显著,以HIBD即刻注射效果最佳。其机制可能与保护线粒体膜,减少Cyt C释放,减轻或抑制caspase-3蛋白酶活性有关。